生長(zhǎng)因子肽進(jìn)行正常人黑素細(xì)胞體外純培養(yǎng)的研究.pdf

1、第一部分:生長(zhǎng)因子肽進(jìn)行黑素細(xì)胞體外培養(yǎng)方法的確立及培養(yǎng)后細(xì)胞的生物學(xué)鑒定.目的:確立生長(zhǎng)因子肽進(jìn)行黑素細(xì)胞培養(yǎng)的方法并對(duì)得到的細(xì)胞進(jìn)行生物學(xué)鑒定.方法:選用生長(zhǎng)因子肽bFGF、ET-1和α-MSH加入MCDB153液中進(jìn)行正常人體黑素細(xì)胞體外培養(yǎng),同時(shí)觀察α-MSH對(duì)黑素細(xì)胞樹突形成的影響.HMB-45抗原的單克隆抗體用于標(biāo)記黑素小體相關(guān)胞漿抗原,以判斷得到的細(xì)胞是否為黑素細(xì)胞.利用光鏡、透射電鏡技術(shù)對(duì)培養(yǎng)得到的黑素細(xì)胞進(jìn)行生長(zhǎng)特性以

2、及形態(tài)、結(jié)構(gòu)上的觀察.結(jié)論:用此方法能夠在短期內(nèi)得到大量增殖的黑素細(xì)胞,同時(shí),黑素細(xì)胞保持了正常的結(jié)構(gòu)和功能.第二部分:培養(yǎng)后黑素細(xì)胞表面HLA-DR抗原表達(dá)的研究.目的:進(jìn)一步研究所選用的生長(zhǎng)因子肽以及培養(yǎng)時(shí)間對(duì)正常人黑素細(xì)胞表達(dá)HLA-DR抗原的影響.方法:用HLA-DR抗原的單克隆抗體對(duì)傳代后第1、2代黑素細(xì)胞進(jìn)行免疫組化染色,設(shè)立同期以TPA,CT作為促分裂劑培養(yǎng)得到的黑素細(xì)胞為對(duì)照組.用流式細(xì)胞儀的方法測(cè)定傳代后第8代黑素細(xì)胞