固本防喘膠囊對哮喘豚鼠氣道炎性細胞凋亡的影響.pdf

1、[目的]研究固本防喘膠囊對哮喘動物模型氣道炎性細胞(主要是嗜酸性粒細胞)凋亡的影響，及其分子調(diào)控機制，為臨床應用提供理論依據(jù)。 [方法]體重200-250g雌性豚鼠50只，隨機分為正常對照組、模型組、西藥對照(地塞米松)組、中藥小劑量治療組、中藥大劑量治療組，每組10只。模型組、西藥對照(地塞米松)組、中藥小劑量治療組、中藥大劑量治療組采用卵蛋白誘導法建立哮喘模型，在實驗第1天，臨時配制10％卵蛋白生理鹽水溶液，豚鼠腹腔注射1毫

2、升以致敏；第15天將致敏的豚鼠置于14升透明玻璃鐘罩內(nèi)，噴射霧化器將1％卵蛋白生理鹽水對豚鼠進行超聲霧化吸入(霧化量由小到大)15-20秒，然后自然吸入15-20秒，出現(xiàn)呼吸頻率加快、點頭呼吸、咳嗽、鼻煽、抽搐等癥狀時為引喘成功。此后，每天以1％卵蛋白生理鹽水霧化誘喘。按最大霧量，自然吸入15-30秒，使哮喘反復發(fā)作，連續(xù)3天；正常對照組以等量生理鹽水進行腹腔注射和霧化。在第一次誘喘24小時后，即從第16天開始分別胃飼給藥，正常對照組及

3、模型組予生理鹽水，西藥組予地塞米松片(1mg/kg)胃飼；中藥小劑量組及中藥大劑量組分別予固本防喘膠囊(雄蜂蛹、仙靈脾、補骨脂、丹參、巴戟天、黃芪、太子參、兔絲子、附片組成)濃縮液(每毫升含生藥2克)小劑量(2.5g/kg)及大劑量(7.5g/kg)胃飼治療10天。觀察造模前后及藥物治療后豚鼠一般情況；療程結束后，處死動物，收集各組動物支氣管肺泡灌洗液及肺組織標本，觀察肺泡灌洗液中血細胞計數(shù)及嗜酸性粒細胞、淋巴細胞含量變化；肺組織形態(tài)及

4、病理學改變；TUNEL法檢測肺組織中嗜酸性粒細胞凋亡及免疫組織化學方法觀察各組豚鼠肺組織中Bc1-2及Bax蛋白表達的情況。結果采用統(tǒng)計軟件SPSS10.0進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析處理，計數(shù)資料以x±s表示，組間資料比較用方差分析。 [結果]空白對照組豚鼠體重自然增加，一般情況可，無死亡。致敏后的豚鼠普遍精神較差，活動減少，進食及飲水量明顯下降。1-2天后逐漸恢復正常。第16天哮喘模型組3只，西藥對照組1只，中藥小劑量組2只豚鼠出現(xiàn)明顯

5、皮毛蓬松現(xiàn)象。第二次誘喘時，哮喘模型組1只豚鼠哮喘發(fā)作嚴重后死亡。用藥后各組豚鼠情況均較哮喘模型組明顯改善，但不能恢復到正常對照組的水平。中藥大劑量組豚鼠肺組織血管損傷修復，肺泡間隔變窄，上皮增生改善，炎細胞明顯減少，肺泡腔明晰。與模型組相比，氣道炎性細胞浸潤顯著減少，與西藥對照組相當；BALF中血細胞總數(shù)及嗜酸性粒細胞和淋巴細胞浸潤明顯減少，與哮喘模型組比較有顯著性差異(P＜0.01)，與西藥對照組相當(P＞0.05)；豚鼠氣道嗜酸性

6、細胞凋亡明顯增加，與哮喘模型組比較亦有顯著性差異(P＜0.01)，與西藥對照組相當(P＞0.05)；哮喘豚鼠氣道Bax表達增加，Bc1-2表達降低，干擾肺組織Bcl-2/Bax的平衡，與哮喘模型組比較有顯著差異(P＜0.05)。 [結論]固本防喘膠囊能誘導或促進哮喘豚鼠氣道EOS凋亡，從而減輕氣道炎性細胞浸潤，控制氣道慢性炎癥，達到防治哮喘的作用。其可能作用機制是通過改變Bc1-2和Bax蛋白在哮喘豚鼠肺組織的表達，即干擾肺組織