固有熒光技術(shù)在胃癌診斷中的基礎(chǔ)與臨床研究.pdf

1、目的：通過(guò)體內(nèi)和體外的研究，評(píng)價(jià)IFS-I固有熒光技術(shù)體內(nèi)診斷胃癌的價(jià)值，并進(jìn)一步探索胃粘膜和胃液中特征性熒光光譜的形成原因。 方法：1.分析IFS-I固有熒光診斷儀對(duì)胃部病灶產(chǎn)生的固有熒光光譜，根據(jù)不同光譜診斷標(biāo)準(zhǔn)求出診斷敏感度、特異度和準(zhǔn)確率。2.采用特異度最高的診斷標(biāo)準(zhǔn)，檢測(cè)胃鏡初查懷疑胃癌的病例。3.利用IFS-I固有熒光診斷儀采集到的熒光光譜，比較胃癌組織不同的分化程度對(duì)固有熒光光譜特征的影響。4.利用IFS-I固有熒

2、光診斷儀采集到的熒光光譜，比較胃癌組織不同的浸潤(rùn)程度對(duì)固有熒光光譜特征的影響。5.激光共聚焦顯微鏡觀察高、中、低分化的三種胃癌細(xì)胞株和正常人胃上皮細(xì)胞株的固有熒光的分布，分析線(xiàn)粒體氧化呼吸鏈阻斷劑對(duì)細(xì)胞內(nèi)固有熒光強(qiáng)度的影響。6.激光共聚焦顯微鏡觀察胃癌和非胃癌冰凍組織切片中固有熒光在各層的表現(xiàn)，比較綠色熒光和紅色熒光濃度比值在不同病理組織的差異。7.建立高效液相色譜(熒光一紫外聯(lián)用)系統(tǒng)測(cè)定胃液中的色氨酸濃度。8.比較胃液中色氨酸濃度在

3、良惡性病變中的差異。9.測(cè)定不同時(shí)段胃癌細(xì)胞株和正常人胃上皮細(xì)胞株細(xì)胞培養(yǎng)液內(nèi)色氨酸濃度的變化，比較良惡性胃粘膜細(xì)胞株對(duì)色氨酸消耗的差異。 結(jié)果：1.在400nm±20nm、670nm±20nm，460hm±20nm三個(gè)位置任意一處出現(xiàn)固有熒光光譜特征即診斷為胃癌的方法胃癌診斷敏感性最高可用于胃癌的普查。在460nm±20hm的熒光特征即診斷為胃癌的標(biāo)準(zhǔn)的特異度最高可用于疑似胃癌者的精查。2.460nm±20nm的標(biāo)準(zhǔn)對(duì)疑似胃癌

4、患者的診斷具有較高的準(zhǔn)確性。3.波長(zhǎng)450nm-550nm間胃癌的分化程度與熒光強(qiáng)度比值呈正相關(guān)，在450nm-500nm處不同分化的胃癌組織熒光強(qiáng)度與良性病灶比較都有顯著降低，可用于診斷。4.根據(jù)在400nm-550nm的胃粘膜熒光特征可診斷不同浸潤(rùn)深度的胃癌組織中。5.細(xì)胞內(nèi)的綠色固有熒光主要來(lái)源于線(xiàn)粒體氧化呼吸鏈，胃癌細(xì)胞內(nèi)綠色固有熒光顯著低于正常細(xì)胞。6.與正常組織比較，胃癌組織粘膜層內(nèi)綠色熒光減弱與紅色熒光比顯著降低，其中綠色

5、熒光顯著降低可用于區(qū)分良惡性病灶。7.胃癌患者胃液中色氨酸濃度顯著高于在良性病灶。8.體外培養(yǎng)的胃癌細(xì)胞對(duì)色氨酸利用度低于正常細(xì)胞。 結(jié)論：本研究首次采用具有我國(guó)自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的337nm激光誘發(fā)固有熒光的診斷儀對(duì)胃部疾病進(jìn)行診斷，該短波長(zhǎng)激光能更完整的顯示400nm-700nm的熒光光譜。通過(guò)熒光光譜分析，我們認(rèn)為該技術(shù)是對(duì)白光胃鏡的有益補(bǔ)充，適于胃癌普查和排查。對(duì)不同分化程度不同浸潤(rùn)度的胃癌，該儀器都能顯示惡性病灶的熒光特征。