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文檔簡介
1、目的:觀察鹽霉素對前列腺癌PC-3細胞及其干細胞體外增殖的影響和對腫瘤干細胞基因表達的影響;初步探討鹽霉素體外作用于前列腺癌PC-3腫瘤干細胞的可能機制。
方法:1、用含160、80、40ug/ml等10個不同濃度的鹽霉素作用前列腺癌PC-3腫瘤細胞,以紫杉醇陽性對照,MTT法檢測出半效濃度(IC50,μg/ml)及最大抑制率(Imax)并繪制腫瘤細胞生長曲線;2、將對數生長期的前列腺癌 PC-3細胞分為空白對照組、溶媒對照組
2、與實驗組,鹽霉素作用24小時后,以“CD133+、CD44+”雙陽性細胞作為腫瘤干細胞,通過流式細胞儀進行干細胞比例分析并分選;3、提取每組腫瘤干細胞總的RNA,用micorarray技術對各組基因表達進行分析,找出表達差異2倍、10倍及以上的基因,并進行統(tǒng)計學分析。
結果:(1)、測得鹽霉素對前列腺癌 PC-3細胞的IC50為9.18±6.66 ug/ml,Imax=99.35%;(2)、流式細胞儀分析結果顯示空白對照組腫瘤
3、干細胞比例均值為0.83%,溶媒組腫瘤干細胞比例均值為0.81%,實驗組腫瘤干細胞比例均值為0.46%,通過兩樣本均數t檢驗,空白對照組與實驗組之間差異具有統(tǒng)計學意義(p<0.05),而空白對照組與溶媒組之間差異不具統(tǒng)計學意義(p>0.05);(3)、micorarray分析結果顯示,上調2倍基因1574個,下調2倍基因1666個,上調10倍及以上的基因有26個,下調10倍及以上的基因有21個,其中與腫瘤干細胞凋亡、生長以及腫瘤耐藥等生
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