新鮮羊膜對周圍神經損傷修復影響的實驗研究.pdf

1、目的:周圍神經損傷是臨床上較常見的致殘性疾病，直接損害了勞動力資源，給社會和家庭生活造成沉重的負擔。周圍神經損傷修復后再生受多種因素的影響，吻合口處的微環(huán)境及局部的癜痕形成嚴重影響了神經損傷后修復效果，為此，改善局部微環(huán)境及減少局部瘢痕有利于周圍神經再生促進神經功能恢復。羊膜具有半透性，保證營養(yǎng)物質順利透過，促進雪旺細胞增殖，加速神經軸索生長，抑制周圍成纖維細胞的生物活性，限制神經周圍組織侵入神經斷端，抑制周圍瘢痕形成，防止神經粘連及神

2、經壓迫等。本實驗構建大鼠坐骨神經損傷模型，在顯微鏡下行神經吻接術，吻接處給予人新鮮羊膜包裹，通過大體觀察、光鏡觀察、透射電鏡、免疫組化、神經電生理檢測、坐骨神經功能指數等指標分析，評價新鮮羊膜促進周圍神經損傷后修復再生的效果。
　　方法:選用成年、健康SD大鼠60只，雌雄不限，體重220克～250克。取一側腿制備坐骨神經急性損傷模型。隨機分A組（修復神經后用人新鮮羊膜包裹吻合口），B組（修復神經后用生物膜包裹吻合口），C組（修復神

3、經后不做任何處理）三組，每組20只。術后2、4、8和12周各行大體觀察、光鏡觀察、免疫組織化學檢測（s-100蛋白在神經組織中的表達情況）;分別于術后4、8、12周各行透射電鏡觀察、軸突成像分析（計數有髓神經纖維數目、軸突直徑及髓鞘厚度）、復合肌肉動作電位檢測（測量并記錄潛伏期、波幅和神經傳導速度）、計算坐骨神經功能指數及其恢復率。所有數據均進行統(tǒng)計學處理。
　　結果:大體觀察:三組大鼠術后手術切口都未出現感染，7天后切口拆線，切

4、口一期愈合;三組大鼠術后2周大部出現下肢稍腫脹，活動明顯減少且跛行。2周后腫脹、精神狀態(tài)及飲食逐漸恢復，A、B組大鼠跛行時間較C組短，活動量恢復更早。A、B組和C組相比足底和足趾皮膚潰瘍大鼠數量少且潰瘍恢復時間短。術后2周羊膜、生物膜局部稍有吸收，4周大部吸收，8周完全吸收。A組、B組神經和周圍組織稍有粘連且粘連較疏松，活動度可。C組神經和周圍組織廣泛緊密粘連，鈍性不易分離，活動度差。光鏡觀察:術后2、4、8、12周A組、B組神經恢復情

5、況明顯優(yōu)于C組。電鏡觀察:術后4周A、B、C三組神經纖維再生均不明顯，板層結構均不清晰。術后8周、12周A、B組比C組神經纖維再生數量更多、髓鞘厚度厚、板層結構更清晰，軸突直徑更大。免疫組織化學檢測:A、B組中S-100蛋白表達及分布均優(yōu)于同時期C組。軸突圖像分析:A、B組神經吻合口遠端有髓神經纖維直徑、髓鞘厚度及橫截面有髓神經纖維數目均優(yōu)于同時期C組，結果有統(tǒng)計學意義(P＜0.05）。神經電生理檢測:術后術側神經的誘發(fā)電位潛伏期、波幅