杜氏鹽藻鞭毛蛋白質(zhì)組學分析和GAPDH基因及其調(diào)控區(qū)的克隆與功能鑒定.pdf

1、鄭州大學博士學位論文杜氏鹽藻鞭毛蛋白質(zhì)組學分析和GAPDH基因及其調(diào)控區(qū)的克隆與功能鑒定姓名：賈巖龍申請學位級別：博士專業(yè)：腫瘤學指導教師：薛樂勛20081201鄭州大學2008年博士論文杜氏鹽藻鞭毛蛋白質(zhì)組學分析和GAPDH基因及其調(diào)控區(qū)的克隆與功能鑒定是人類纖毛相關(guān)缺陷或突變性疾病十分理想的研究模式。通過對模式生物進行研究不僅可以幫助我們了解鞭毛／纖毛結(jié)構(gòu)功能與人類相關(guān)疾病的關(guān)系，而且可以闡明許多至關(guān)重要的生命過程，包括細胞分裂周期

2、、細胞凋亡和發(fā)育及信號轉(zhuǎn)導等。因此，為了解纖毛在發(fā)育和生理過程中的作用，很有必要對纖毛裝配和功能所必需的基因及其蛋白產(chǎn)物進行研究和鑒定。杜氏鹽藻(Dunaliellasalina，Dsalina)是一種比較獨特的高度耐鹽單細胞真核綠藻：具雙鞭毛而能游動，沒有細胞壁，含有一個較大的杯狀葉綠體能進行光合作用；可在含有005M一5MNaCl的環(huán)境中生長。極其耐鹽的抗逆性能力，簡單的細胞結(jié)構(gòu)以及便利的培養(yǎng)條件使杜氏鹽藻成為重要模式生物和遺傳學研

3、究的良好材料。鹽藻細胞可利用其鞭毛進行運動和交配期細胞間的識別。由于鹽藻鞭毛位于細胞的表面，所以易于分離并進行生化和遺傳分析。所以，以鹽藻作為模式生物來研究真核細胞鞭毛的裝配和功能有如下獨特的優(yōu)點：(1)其單倍體基因組適于進行表型遺傳分析；(2)應(yīng)用電轉(zhuǎn)法、粒子轟擊法(基因槍法)和玻璃珠法等轉(zhuǎn)化方法，其核及葉綠體基因組可進行遺傳轉(zhuǎn)化和表達分析；(3)突變體和分子標記可用于相關(guān)基因的克隆鑒定。(4)在鹽藻中可以大量提取并純化鞭毛蛋白以進行