幽門螺桿菌空泡毒素基因分段克隆、表達(dá)和活性研究.pdf

1、幽門螺桿菌（Helicobacter pylori,簡稱Hp）是定植于人胃部的一種革蘭氏陰性菌,它與慢性胃炎、消化性潰瘍、粘膜相關(guān)淋巴樣組織性淋巴瘤、胃癌等疾病的發(fā)生密切相關(guān),它的感染率高,并且因?yàn)槿嗣庖呦到y(tǒng)無法根除而長期生存于人的胃部.空泡毒素基因的表達(dá)產(chǎn)物-VacA（vacuolating cytotoxin A）是Hp所特有的分泌性毒素,是Hp的重要毒力因子,在體外,它能使哺乳動物上皮細(xì)胞發(fā)生空泡樣變化,最終導(dǎo)致細(xì)胞死亡,它與Hp

2、感染者的發(fā)病與否相關(guān).在該研究工作中,我們首先對vacA基因進(jìn)行分段克隆、表達(dá).之后,我們分別將誘導(dǎo)表達(dá)的His<,6>-B和His<,6>-D PAGE膠切下,用中性脫色液調(diào)整pH值,免疫成年純種新西蘭大白兔,共免疫注射四次.該文分段克隆、表達(dá)了與Hp感染者發(fā)病密切相關(guān)的空泡毒素基因.在此基礎(chǔ)上制備抗空泡毒素的抗血清,并用臨床血清檢測重組蛋白的抗原性.同時構(gòu)建重組真核表達(dá)載體,借助于基因轉(zhuǎn)染檢測具有空泡毒素活性的片段.為進(jìn)一步在臨床上