腎衰Ⅰ號對單側輸尿管結扎大鼠腎組織中Ang-Ⅱ表達的影響.pdf

1、目的： 探討腎衰Ⅰ號水煎液對單側輸尿管結扎大鼠腎組織中Ang-Ⅱ表達的影響及其作用機制。 方法： 將60只wistar大鼠隨機分為5組，即模型組、腎衰Ⅰ號組、貝那普利組、假手術組和空白組，每組12只．其中模型組、腎衰Ⅰ號組和貝那普利組：用2％戊巴比妥鈉按30mg/kg腹腔注射麻醉后將大鼠固定、去毛備皮，打開腹腔結扎左側輸尿管后逐層縫合切口。結扎日起三天內(nèi)每天肌注青霉素8萬單位/只預防感染。其中模型組用生理鹽水灌胃

2、10ml/(kg·d)，共14天；腎衰Ⅰ號組：每日用腎Ⅰ衰號水煎液灌胃一次，劑量為8g/(kg·d)，共14天。貝那普利組：每日灌胃一次，劑量為5mg/(kg·d)，共14天。假手術組：同樣麻醉后打開腹腔但不結扎輸尿管，并逐層縫合切口，肌注青霉素，生理鹽水灌胃10ml/(kg·d)，共14天?？瞻捉M：不作手術，只肌注青霉素3天和生理鹽水灌胃10ml/(kg·d)，共14天。輸尿管結扎后第13天開始各組按隨機原則各取10只大鼠分別置于代謝

3、籠中收集24小時尿液，送湖北省中醫(yī)院同位素室測尿β2-mG含量；第14天將各組大鼠摘眼球，用抗凝管取血，送湖北省中醫(yī)院檢驗科測血肌酐含量；將大鼠處死，留取梗阻側腎臟標本，置于10％中性甲醛固定液中保存，用以作腎組織切片HE染色和腎組織中Ang-Ⅱ表達的檢測。 腎組織切片HE染色后，每組隨機取10張切片，高倍鏡下(×200)觀察比較各組腎間質(zhì)纖維化程度。結果采用單盲法評估，按如下方法評分：分為-、+、++，+++4個等級，分別記0

4、、1、2、3分。(-)為小管間質(zhì)無病變； (+)為輕度，小管間質(zhì)病變范圍<20％； (++)為中度，病變范圍在20％～40％；(+++)為重度，病變范圍>40％。連續(xù)觀察不重疊的10個高倍視野，綜合進行等級評分。 腎組織中Ang-Ⅱ表達的檢測中免疫組化采用SABC法，每組隨機取10張切片，用同濟千屏影像工程公司HPIAS2000型圖像分析軟件分析，每張切片(×400)光鏡下隨機采集5個不重疊視野，棕黃色(Ang-Ⅱ染色區(qū))為陽性

5、染色區(qū)。測量染色區(qū)平均光度值。 統(tǒng)計學方法使用SPSS11.5統(tǒng)計軟件包進行統(tǒng)計分析，計量資料用X±S表示。組間比較采用t檢驗。 結果： 1.尿β2-mG的測定腎衰Ⅰ號組和貝那普利治療組尿β2-mG含量較模型組明顯降低(P<0.01)，高于假手術組和空白組(P<0.01)；腎衰Ⅰ號和貝那普利治療組之間尿β2-mG含量無明顯差異(P>0.05)。 2.血肌酐測定腎衰Ⅰ號組、貝那普利組與空白組、假手術組之間無

6、統(tǒng)計學差異(P>0.05)；腎衰Ⅰ號組、貝那普利組與模型組之間無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。 3.病理觀察 HE染色顯示假手術組和空白組腎小管結構正常；模型組部分腎小管擴張，小管皮質(zhì)變薄，部分腎小管萎縮，炎性細胞浸潤明顯；腎衰Ⅰ號組和貝那普利組病變較模型組減輕．腎衰Ⅰ號組與貝那普利組相當。 4.腎間質(zhì)纖維化HE染色記分腎衰Ⅰ號組和貝那普利組記分明顯低于模型組(P<0.01)，高于空白組和假手術組(P<0.01)；

7、腎衰I號組和貝那普利組之間記分無明顯差異(P>0.05)。 5.腎組織中Ang-Ⅱ陽性表達腎衰Ⅰ號組和貝那普利組平均光度值明顯低于模型組(P<0.01)，高于假手術組和空白組(P<0.01)；腎衰Ⅰ號組平均光度值低于貝那普利組(P<0.05)。 結論： 本研究表明：腎衰Ⅰ號煎劑具有阻緩腎間質(zhì)纖維化的作用。其作用機制之一可能是阻緩Ang-Ⅱ在腎問質(zhì)中表達，從而阻緩Ang-Ⅱ在腎纖維化中的作用： ①誘導腎間質(zhì)