甲霜靈對大豆疫霉野生菌株及突變菌株影響的組織細胞學研究.pdf

1、由大豆疫霉菌(Phytophthora soiae)引起的大豆疫病是大豆上危害嚴重的毀滅性病害之一。該病是我國A1類進境植物檢疫對象，也是內檢對象。甲霜靈[N-(2,6-dimcthyl phenyl)-N-mcthoxyacetyl alanine]屬苯酰胺類殺菌劑，是防治疫霉菌所致病害的特效藥。但由于甲霜靈屬特異性位點抑制劑，病菌容易對其產生抗性突變。本研究采用電鏡技術系統(tǒng)研究了大豆疫霉野生菌株和突變菌株的形態(tài)學及細胞學差異，甲霜靈

2、在活體外對野生菌株及突變菌株的形態(tài)結構及細胞結構的影響，并在此基礎上研究了甲霜靈種衣劑處理對大豆疫霉疫霉菌野生菌株和突變菌株侵染影響的組織病理學變化。本研究主要取得了以下成果： 1、野生菌株Ps-411和突變菌株Ps-411-M在菌絲形態(tài)和結構上有明顯差異：Ps-411菌絲纖細、線狀，線條流暢，近直角分支，分支間距較長，細胞內含質充盈，胞壁均勻；Ps-411-M生長不規(guī)則，分支較密集，菌絲體較粗壯，少數(shù)菌絲頂端膨大、扭曲，菌絲細

3、胞內液泡及線粒體數(shù)目明顯高于Ps-411。 2、不同濃度甲霜靈處理后可導致野生菌株和突變菌株發(fā)生一系列不同的變化。低濃度(1μg/mL)處理后，野生菌株在培養(yǎng)基上的生長即可受到抑制，菌絲呈現(xiàn)不規(guī)則的腫脹、過度分枝；菌絲細胞壁不規(guī)則加厚，菌絲細胞內液泡增加，脂肪粒累積，細胞器排列紊亂，原生質最終壞死。隨濃度的升高，野生菌株立即停止生長，菌絲干癟壞死。而突變菌株只在高濃度(10μg/mL)甲霜靈處理后頂端菌絲出現(xiàn)少量較小的分枝，菌絲

4、細胞壁無增厚現(xiàn)象，但細胞內脂肪粒大量積累，明顯高于敏感性菌株；突變菌株在高濃度甲霜靈壓力下仍繼續(xù)生長。 3、大豆幼苗下胚軸試驗表明：突變菌株Ps-411-M和野生菌株Ps-411在大豆幼苗下胚軸的侵染過程相似，都主要以侵染菌絲直接侵入表皮，表皮細胞間隙為主要侵入部位。胞間菌絲侵入皮層細胞并形成吸器。突變菌株Ps-411-M致病力Ps-411-M要略弱于野生菌株Ps-411。甲霜靈種衣劑處理后，Ps-411的生長和擴展受到抑制，病

5、狀表現(xiàn)為非親和反應，而Ps-411-M則表現(xiàn)為較高的致病力，病狀表現(xiàn)為親和反應。 4、甲霜靈種衣劑處理可引起野生菌株Ps-411發(fā)生一系列細胞學變化。休止孢萌發(fā)畸形：芽管腫脹或極度延伸，不能形成附著孢。萌發(fā)相對滯后0.5h；入侵的菌絲僅在表皮和皮層間擴展。菌絲細胞發(fā)生明顯的超微結構變化：菌絲細胞有質壁分離、原生質壞死現(xiàn)象，液泡增大，寄主細胞壁加厚阻礙入侵栓的形成，類吸器發(fā)育畸形；菌絲與寄主接觸部位出現(xiàn)大量的胞壁沉積物，有時寄主分