姜黃素抑制Aβ25-35引起B(yǎng)V2細胞神經炎癥反應的機制.pdf

1、目的:β淀粉樣蛋白(Aβ)可活化誘導小膠質細胞分泌炎性細胞因子而加重神經元損傷，但相關機制尚未明確。本研究旨在觀察高遷移率族蛋白1(HMGB1)對糖基化終末產物受體(RAGE)介導小膠質細胞產生炎癥反應的影響，并進一步探討姜黃素(Cur)對阿爾茨海默病(AD)炎癥細胞活力、HMGB1、白細胞因子1β(IL-1β)、腫瘤壞死因子α（TNF-α）表達的影響，為Cur用于AD的臨床治療及抗神經炎性反應提供理論依據。
　　方法:
　

2、　1、采用β-淀粉樣蛋白的活性片段Aβ25-35致小鼠小膠質瘤(BV2)細胞炎癥為AD模型，作用24小時后，行細胞形態(tài)學觀察及CCK8檢測細胞活力，應用免疫印跡技術(Western blot)法檢測細胞內HMGB1、RAGE、NF-κB的表達情況，取上清液采用酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測HMGB1、IL-1β、TNF-α的表達。
　　2、將對數生長期的BV2細胞分為4組:正常組（A組）:不做任何處理，Aβ25-35模型組（B組

3、）:40μmol/LAβ25-35刺激24h，Aβ25-35+RAGE受體阻斷組（C組）:抗RAGE抗體10μmol/L預處理1h后，加入40μmol/L的Aβ25-35刺激24h，Aβ25-35+Cur治療組（D組）:Cur8μmol/L預處理1h后，加入40μmol/L的Aβ25-35刺激24h。
　　結果:
　　1、根據CCK8的細胞活性檢測結果確定Aβ25-35的有效濃度為40μmol/L，作用時間為24h;Cur的

4、治療濃度為8μmol/L。細胞形態(tài)學觀察模型組貼壁速度明顯慢于正常組，細胞出現聚集狀態(tài)，胞體伸出一個或多個樹枝狀突起，連接周圍細胞。
　　2、Western blot結果:①與A組相比，B組在Aβ25-35活化誘導后，細胞內HMGB1、RAGE和NF-κB表達明顯升高（P＜0.05）。②C組在加入RAGE受體阻斷劑后，細胞內HMGB1、RAGE和NF-κB表達與B組相比差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。③D組在加入Cur后，與B組

5、相比，細胞內HMGB1、RAGE和NF-κB表達明顯減少（P＜0.05）。
　　3、ELISA結果:①與A組相比，B組在Aβ25-35活化誘導后，上清液中HMGB1、IL-1β、TNF-α明顯升高(P＜0.05)。②C組與B組相比TNF-α有所下降（P＜0.05），HMGB1及IL-1β表達差異無統(tǒng)計學意義。③D組在加入Cur后，與B組相比，HMGB1、IL-1β、TNF-α明顯下降(P＜0.05);與A組相比，HMGB1、TNF