變異鏈球菌htrA及clpP基因對其生長特征影響的初步研究.pdf

1、目的:建立變異鏈球菌標準株、htrA基因缺陷株、clpP基因缺陷株及htrA-clpP雙基因缺陷株的生長模型，觀察比較幾種菌株在不同碳源條件下的生長情況的差異；通過檢測試劑監(jiān)測各菌株在不同碳源培養(yǎng)基中生長過程中消耗碳源情況的差異來分析比較clpP基因及htrA基因在變異鏈球菌生長能力方面的功能。
　　方法:利用變異鏈球菌標準株及前期實驗構建成功的htrA基因缺陷株、clpP基因缺陷株及htrA-clpP雙基因缺陷株，將其分別培養(yǎng)在

2、含有1％葡萄糖、1％蔗糖及無碳源的TPY培養(yǎng)基中，在37℃微需氧條件下培養(yǎng)，采用酶聯免疫檢測儀，以一定的時間間隔測定各菌株在各時間點的吸光度值(A值)分別確定各菌株在各培養(yǎng)條件下的生長曲線，同時通過葡萄糖氧化酶法試劑盒及蒽酮-硫酸法測定各菌株在其生長過程中的耗糖情況。分別比較各碳源條件下各菌株的生長曲線和耗糖情況的差異。
　　結果:在含有l(wèi)％葡萄糖的普通TPY培養(yǎng)基中，缺陷株生長的對數期較標準株短，且吸光度值的峰值明顯低于標準株(

3、P<0.05)。在整個生長期三種缺陷株的OD值都較接近，無明顯差異。在對數期階段，三種缺陷株的耗糖量均明顯高于標準株，而進入平臺期后各缺陷株與標準株的耗糖量逐漸接近，但在各個時間點各種缺陷株與標準株耗糖量的差別均有統(tǒng)計學意義(p<0.05)。在蔗糖作為碳源的條件下培養(yǎng)時，各菌株吸光度值的峰值均高于葡萄糖條件下生長時的同種菌株，標準株消耗蔗糖的量稍低于各缺陷株(p<0.05)，缺陷株的耗糖情況無明顯差異(p<0.05)。無碳源條件下，標準