核桃粕多肽提取分離及功能特性研究.pdf

1、核桃具有很高的營養(yǎng)價值和藥用價值，是開發(fā)高級保健食品的良好原料。本論文用不同蛋白酶酶解核桃粕蛋白，測定了酶解產(chǎn)物的特性、抗氧化性及體外ACE抑制功能，采用Sephadex G-25對蛋白酶酶解產(chǎn)物進(jìn)行了分離，測定了不同分子片段多肽的功能特性。取得以下結(jié)果： 木瓜蛋白酶酶解核桃粕蛋白質(zhì)最佳的酶解條件為酶解溫度為65℃，pH為6.5，底物濃度為3％，加酶量(E/S)為7000 u/g，用超聲波功率750w的60％預(yù)處理12min。堿

2、性蛋白酶酶解核桃粕蛋白質(zhì)的最佳的酶解條件為酶解溫度為55℃，pH為8，底物濃度為3％，加酶量(E/S)為4000 u/g，用超聲波功率750w的50％預(yù)處理9min。 在最佳酶解條件下木瓜蛋白酶酶解核桃粕蛋白180min，酶解液的乳化能力和乳化穩(wěn)定性分別為140.7和20.8最高值；木瓜蛋白酶酶解產(chǎn)物中5733～1321Da片段的多肽其乳化性能和乳化穩(wěn)定性最好，分別為165.6、19.5。 堿性蛋白酶酶解核桃粕蛋白，在最

3、佳酶解條件下酶解120min時酶解液的乳化能力最大為157.6，150min時乳化穩(wěn)定性最高為21.8。堿性蛋白酶酶解產(chǎn)物中5733～1321Da的多肽乳化能力最高值為165.6， 12384～5733Da的多肽乳化穩(wěn)定性最好為19.7。 在最佳的酶解條件下木瓜蛋白酶酶解核桃粕蛋白210min，酶解液的抗氧化活性較高，其中OH·清除率為55.43％，02-·清除率為64.23％，DPPH·清除率79.32％，總抗氧化能力98.7

4、4單位/ml。分子量在1321～607Da片段的多肽其抗氧化性較好，0H·清除率為42.26％，02-·清除率57.33％，DPPH·清除率為74.43％，總抗氧化能力88.43單位/ml。 在最佳酶解條件下，堿性蛋白酶酶解核桃粕酶解210min的酶解液的OH·清除率為72.3％；總的抗氧化能力為171.579單位/ml；02-·清除能力為83.1％，DPPH·清除能力為102.6％?？寡趸远嚯闹饕性?321～612Da之

5、間，占整個多肽含量的13.22％；02-·清除率為62.57％，OH·清除率為70.23％、DPPH·清除率為99.56％，總抗氧化能力為118.987單位/ml。 濃度為300mmol/L的NaCl和100mmol/L硼酸鹽緩沖體系對ACE活性保護(hù)最好。通過響應(yīng)面分析得出木瓜蛋白酶最佳的酶解條件為溫度60℃，pH為7.5，底物濃度為3％；加酶量(E/S)為6000 u/g，酶解時間為240min，酶解液對ACE抑制較好；其分子

6、量分布在612—307Da的多肽ACE抑制率最大為93.56％，該片斷占整個酶解液多肽片段的9.81％，總的游離氨基酸含量占該多肽片段含量的8.431％，含量最高的氨基酸為亮氨酸(Leu)。堿性蛋白酶解的最佳條件為溫度40℃，pH為8.5，底物濃度為3％，加酶量(E/S)為5000 u/g，酶解時間為150min，酶解液對ACE抑制較好；其分子量分布在1321-612Da多肽ACE抑制率最大為93.27％，該片斷占整個酶解液多肽片段的1