Nedd4-1在胃癌發(fā)生發(fā)展過程中的作用.pdf

1、目的:
　　胃癌是發(fā)病率、轉(zhuǎn)移率和死亡率較高的惡性腫瘤之一。賁門癌是胃癌中最具侵襲性的類型。目前，胃賁門癌的治療仍以手術為主，缺乏有效的化療和靶向治療的藥物和方法。進一步開展胃賁門癌發(fā)生發(fā)展機理的研究，鑒定和發(fā)現(xiàn)新的分子標志物和治療靶點，對胃賁門癌的診斷、治療和預后十分必要。前人的研究表明，E3泛素連接酶Nedd4-1可能參與惡性腫瘤的發(fā)生和發(fā)展過程。本論文重點探討Nedd4-1在胃賁門癌發(fā)生發(fā)展中的作用，確定Nedd4-1是胃賁

2、門癌患者的預后標志物來進一步預測患者生存率和治療效果。
　　方法:
　　1.將214例賁門癌的腫瘤組織樣品制成組織芯片，采用免疫組織化學染色法分析214例賁門癌的腫瘤組織中Nedd4-1的表達。
　　2.收集胃賁門癌患者的臨床資料，統(tǒng)計分析Nedd4-1的表達與賁門癌腫瘤的發(fā)病期關聯(lián)度。
　　3.利用慢病毒表達系統(tǒng)將胃癌細胞株AGS和N87的Nedd4-1進行knockdown,采用Western blottin

3、g技術對Nedd4-1的knockdown效果進行鑒定。
　　4.采用細胞愈合實驗和Transwell實驗確定Nedd4-1在胃癌細胞遷移和侵襲中的作用。
　　結(jié)果:
　　1.我們對214例胃賁門癌組織切片進行初步的染色分析，結(jié)果表明Nedd4-1在83％的賁門癌組織中過表達。
　　2.Nedd4-1陰性的GCA患者5年生存率高達96％。Log-rank分析表明Nedd4-1的表達與患者累積生存率成負相關（x2=

4、21.885，p＜0.001）。多因素Logistic回歸分析顯示Nedd4-1過表達的TNMⅠ-Ⅲ期GCA患者具有極低的生存率，其風險比HR為0.068，p為0.008。統(tǒng)計分析Nedd4-1表達與臨床病理資料的相關性顯示，Nedd4-1表達與TNM分期密切相關(p＜0.001)。
　　3.在胃癌細胞AGS和N87細胞株中，成功建立穩(wěn)定Nedd4-1-knockdown細胞株。
　　4.敲低Nedd4-1表達導致胃癌AGS

5、和N87細胞遷移和侵襲消失以及表皮生長因子刺激的細胞遷移和侵襲能力顯著降低。
　　結(jié)論:
　　E3泛素連接酶Nedd4-1在83％賁門癌腫瘤樣本中過表達。Nedd4-1表達與賁門癌患者的生存率呈負相關。Nedd4-1陰性的賁門癌患者有較高的存活率，表明Nedd4-1可用于賁門癌患者術后生存的預測。Nedd4-1過表達與TNM期密切相關，Nedd4-1敲低細胞的遷移和侵襲能力顯著降低，表明Nedd4-1在賁門癌的轉(zhuǎn)移中起關鍵作