P65、β-catenin表達在乳腺癌發(fā)生發(fā)展中的作用研究.pdf

1、目的：乳腺癌是女性常見的惡性腫瘤，居全球女性惡性腫瘤發(fā)病率的首位，在我國的發(fā)病率呈穩(wěn)定上升的趨勢。乳腺癌的75％表現為浸潤性導管癌，目前按病理學進程大致將其發(fā)生劃分為正常乳腺上皮→增生→不典型增生→原位癌→浸潤性癌→轉移性癌等幾個階段，但其過程中確切分子機制至今仍不詳。隨著分子生物學技術和蛋白與基因組學的進步，乳腺癌相關新基因和細胞信號轉導通路的逐步闡明，探討其參與乳腺癌發(fā)生發(fā)展中的作用和意義將是重要課題。迄今，分析NF-κB信號途徑的

2、關鍵蛋白P65和Wnt信號途徑的中心成員β-catenin是乳腺癌研究領域受關注的熱點。 NF-κB已知有5個家族成員：P50、P52、P65(RelA)、C-Rel和RelB。其中分布廣泛的為P50/P65二聚體，兩個亞單位都能與靶基因的啟動子DNA結合，但只有P65末端含有反式激活結構域，具有激活基因轉錄的作用。因而，P65是NF-κB信號通路中的一個關鍵蛋白。當細胞受到內毒素、過氧化物、細胞毒素、紫外線、離子射線等的細胞外

3、信號刺激時，P65被活化并上調與腫瘤發(fā)生及進展階段相關的癌基因，影響細胞增殖和凋亡，從而導致腫瘤的發(fā)生。 β-catenin是一種細胞骨架蛋白，其中心區(qū)域含有12個不完全重復序列，在與鈣粘蛋白、APC、T細胞因子(T-cellfactor,TCF)等的結合過程中有重要作用。胞質內β-catenin的穩(wěn)定是經典Wnt/β-catenin信號通路的核心因素。當β-catenin處于低水平時，Wnt通路關閉，反之，Wnt通路開啟。β-

4、catenin進入細胞核和TCF轉錄因子結合，誘導腫瘤相關靶基因的表達，促進腫瘤細胞的異常增殖和浸潤、轉移。β-catenin除了是Wnt信號通路的中心成員，也參與細胞間黏附的調節(jié)，可能對腫瘤的發(fā)展起到一定的作用。 研究表明，P65和β-catenin在人乳腺癌組織中均有高表達，但它們在乳腺癌發(fā)生發(fā)展序列中的作用時點、機制及兩者的相關性仍不詳。本課題選擇乳腺囊性增生病、導管內乳頭狀瘤→導管上皮異型增生→導管內癌(或伴早期浸潤)→

5、浸潤性導管癌作為研究路線，采用免疫組化的方法(Envision+法)對2000年6月-2005年6月收治的不同病理階段的乳腺組織中P65、β-catenin的表達狀況進行檢測，探討兩者在乳腺癌發(fā)生發(fā)展中的作用、相關性及其與相關臨床病理參數的關系，并為乳腺癌的防治提供依據。 材料與方法：采用免疫組化的方法(Envision+法)研究2000年6月-2005年6月經手術病理證實的27例乳腺囊性增生病、25例導管內乳頭狀瘤、26例導管

6、上皮異型增生、29例導管內癌(或伴早期浸潤)、58例浸潤性導管癌組織中P65、β-catenin的表達狀況、相關性和與臨床病理參數的關系。采用SPSS10.0forwindows軟件進行統(tǒng)計分析，率的比較采用X2檢驗，相關性分析采用Spearman法。 結果：1、P65在乳腺導管內乳頭狀瘤、囊性增生病、囊性增生病伴異型、導管內癌(或伴早期浸潤)和浸潤性導管癌中的陽性表達率分別為8.0％、11.1％、42.3％、31.0％和48.

7、3％。各組間表達的差異具有統(tǒng)計學意義(X2=12.561，P＜0.05)。在囊性增生病伴異型、導管內癌(或伴早期浸潤)和浸潤性導管癌中的陽性表達率明顯高于囊性增生病和導管內乳頭狀瘤(X2=6.632，P＜0.05)。 2、P65在乳腺浸潤性導管癌中的表達與組織學分級(X12=4.199，X22=4.25，P＜0.05)、淋巴結轉移(X2=5.625，P＜0.05)和TNM分期均有顯著的相關性(X2=5.871，P＜0.05)；與

8、腫瘤直徑的大小、年齡無明顯相關性。在乳腺導管內癌，有無早期浸潤P65表達的差異無統(tǒng)計學意義((X2=3.155，P＞0.05) 3、β-catenin在乳腺導管內乳頭狀瘤、囊性增生病、囊性增生病伴異型、導管內癌(或伴早期浸潤)和浸潤性導管癌中的陽性表達率分別為4.0％、3.7％、23.1％、72.4％和79.3％。各組間表達的差異具有統(tǒng)計學意義(X2=76.877，P＜0.01)。但良性疾病囊性增生病和導管內乳頭狀瘤之間(X2=

9、0.003，P＞0.05)及導管內癌(或伴早期浸潤)與浸潤性導管癌之間(X2=0.519，P＞0.05)的差異無統(tǒng)計學意義。 4、β-catenin的單純膜表達與腫瘤直徑的大小、TNM分期和淋巴結轉移狀況顯著相關。直徑小的表達率更高(X2=8.526，P＜0.01)。Ⅰ、Ⅱ期的表達率高于Ⅲ期(X2=23.684，P＜0.01)。淋巴結無轉移的表達率明顯高于有轉移組(X2=12.737，P＜0.01)。膜表達與腫瘤的組織學分級(X

10、2=2.503，P＞0.05)、患者年齡均無明顯的相關性(X2-2.632，P＞0.05)。β-catenin的膜漿共表達與淋巴結是否轉移具有顯著相關性(X2=6.67，P＜0.05)，與臨床分期、組織學分級等無明顯相關(P＞0.05)。β-catenin膜漿表達的淋巴結轉移率高于膜表達組(X2=5.476，P＜0.05)。 5、P65和β-catenin同時表達時，TNMⅢ期(X2=5.280，P＜0.05)、淋巴結轉移率(X

11、2=7.816，P＜0.01)和組織學Ⅲ級(X2=6.348，P＜0.05)的比例均明顯高于非同時表達組，而Ⅰ、Ⅱ期(X2=5.280，P＜0.01)和Ⅰ級的比例(X2=8.114，P＜0.01)明顯減低，但對年齡(X2=2.632，P＞0.05)和腫瘤直徑的大小(X2=1.115，P＞0.05)無明顯影響。P65和β-catenin的表達在乳腺導管內乳頭狀瘤和囊性增生病兩者無明顯相關性(r=0.180，P＞0.05)。在囊性增生病伴異

12、型(r=0.392，P＜0.05)和乳腺導管癌(r=0.429，P＜0.01)兩者有明顯的正相關。 結論：1、P65和β-catenin在囊性增生病伴異型、導管內癌(或伴早期浸潤)和浸潤性導管癌中的陽性表達率明顯高于囊性增生病和導管內乳頭狀瘤，它的作用可能始于癌變的早期并持續(xù)存在。 2、P65在乳腺癌中的表達與組織學分級、淋巴結轉移、TNM分期均有顯著的正相關性，提示P65與浸潤、轉移有關；β-catenin的膜漿表達與

13、淋巴結轉移呈正相關，提示β-catenin蛐膜漿表達的乳腺癌易發(fā)生轉移，兩者可能是預后不良的因素。β-eatenin的膜表達與腫瘤直徑的大小、TNM分期和淋巴結轉移狀況呈負相關，可能提示預后較好。 3、P65和β-catenin表達在乳腺導管內乳頭狀瘤和囊性增生病中兩者無明顯相關性，在囊性增生病伴異型和乳腺導管癌兩者有明顯的正相關。當P65和β-eatenin同時表達時，TNMⅢ期、淋巴結轉移率和組織學Ⅲ級的比例均明顯高于非同時