組織工程動脈血管組織構建的初步實驗研究.pdf

1、目的：1)運用細胞培養(yǎng)技術獲取犬的血管平滑肌細胞，并培養(yǎng)擴增，為組織工程動脈的構建提供種子細胞；2)評價bFGF調(diào)控犬血管平滑肌細胞增殖的合理劑量，及其對平滑肌細胞在生物可降解材料上生長的影響；3)對新合成的生物可降解材料進行細胞毒性及生物相容性評價，探討它們作為組織工程動脈血管支架材料的可行性；4)進行組織工程動脈組織構建的初步實驗，為最終獲得組織工程動脈移植體并應用到臨床奠定實驗基礎?！　》椒ǎ?)采用組織貼塊法培養(yǎng)犬的血管平滑肌

2、細胞，并進行細胞傳代培養(yǎng)。觀察細胞的形態(tài)、生長情況，進行免疫組織化學染色，及電鏡檢測。　　2)對培養(yǎng)的平滑肌細胞給予不同劑量的bFGF，作用不同時間后應用四甲基偶氮唑鹽(MTT)比色法檢測，比較不同劑量bFGF組之間的平滑肌細胞增殖情況。　　3)應用L929細胞株進行生長抑制實驗，結合MTT法分別對幾種新合成支架材料的細胞毒性進行評價?！　?)將平滑肌細胞種植于膠原膜上，培養(yǎng)13天后形成多層生長的平滑肌細胞層，再將內(nèi)皮細胞接種在其

3、表面培養(yǎng)兩天，形成單層內(nèi)皮細胞層和多層平滑肌層組成的血管組織?！　〗Y論：1)犬血管平滑肌細胞及內(nèi)皮細胞可作為組織工程動脈實驗研究的種子細胞?！　?)bFGF能夠明顯刺激犬的血管平滑肌細胞增殖，其合理劑量為3ng/mL；在構建組織工程動脈時可以應用bFGF進行調(diào)控。 3)水凝膠、PHBV、PU、PHBV和PU共混體的細胞毒性達到國家標準，可以作為組織工程材料進行應用。 4)可以應用犬的血管平滑肌細胞和內(nèi)皮細胞在膠原載體