細胞周期相關基因微陣列的構建及其在中藥篩選中的應用.pdf

1、原發(fā)性肝癌(Hepatocarcinoma)是一種常見的惡性程度極高的腫瘤,在中國居于腫瘤死亡率第二位,為當前需要重點研究的疾病,因此篩選抗肝癌藥物具有重要的現(xiàn)實意義.傳統(tǒng)中藥用于治療癌癥已有悠久的歷史,中藥治療癌癥具有多位點,副作用小等優(yōu)點,但同時中藥存在藥效機制不明確和藥方復雜等缺點,為中藥抗癌治療的研究帶來了一定的困難.近年來隨著細胞生物學和分子生物學對肝癌發(fā)生的本質的闡明,抗癌藥物的研究水平有明顯提高,中藥治療肝癌已顯示出較大的

2、優(yōu)勢,并得到廣泛的應用.已證明細胞周期調控異常與腫瘤發(fā)生密切相關,該研究選擇細胞周期與損傷檢測相關的基因作為該文研究中藥作用機理的靶點,制備了包含24個基因的cDNA微陣列,并檢測了微陣列的各項參數(shù),證明微陣列結果的可靠性.該研究選擇了1 種具有抗腫瘤潛力的中藥,以肝癌細胞系SMMC-7721細胞作為初篩模型,NIH-3T3成纖維細胞作為正常細胞檢測藥物的毒性,其中五種對SMMC-7721細胞抑制率高而對NIH-3T3細胞抑制率較低,分

3、別為烏藥(Radix Linderae)、紫草(Hebra Artemisiae Annuae)、黃芪(Radix Arnebiae)、青蒿(Radix Astragali)和遠志(Radix Polygalne).同時該實驗利用LOGIT法計算了每種藥物的半數(shù)致死計量(IC50);通過熒光染色技術和流式細胞技術研究了五種中藥作用的細胞學機理;并采用該實驗設計的cDNA微陣列檢測了中藥作用細胞后對細胞周期和損傷檢測相關基因轉錄的影響.五

4、種中藥作用SMMC-7721后,細胞周期基因和損傷檢測點基因均有不同程度改變,部分基因表達上調,部分基因下調,這些和流式細胞術檢測的結果是相符合的.同時該研究還對五種中藥進行了初步的組合研究,通過設計正交抑制率試驗獲得了四種比較有效的組合,利用cDNA微陣列檢測藥物組合作用的分子學機理,發(fā)現(xiàn)不同組合作用后,基因表達有不同變化,但也有一定的規(guī)律,另外還研究發(fā)現(xiàn)黃芪是藥物組合中一種比較有效的成分,這些結果,為我們科學的研究中藥提供了一定的指