ODAM對結直腸癌細胞增殖功能的影響.pdf

1、目的:通過瞬時轉染、穩(wěn)定轉染及純化蛋白等方法,研究ODAM對結直腸癌細胞系HCT8增殖功能的影響,為深入了解結直腸癌的發(fā)生發(fā)展機制提供理論依據(jù)。
　　方法:(1)采用實時定量PCR分別檢測結直腸癌細胞系HCT8、COLO205、HCT116和SW480中ODAM的mRNA表達水平;(2)利用小RNA干擾片段,瞬時干擾結直腸癌細胞系HCT8后,進行CCK-8實驗;(3)構建ODAM干擾及過表達慢病毒載體,篩選穩(wěn)定轉染成功的細胞,分別

2、進行CCK-8實驗;(4)構建V152-ODAM重組質粒,采用層析法獲取ODAM重組蛋白純化液,設置濃度梯度進行CCK-8實驗。
　　結果:(1)ODAM在結直腸癌細胞系HCT8中表達較高,在COLO205、HCT116和SW480中表達較低;(2)瞬時轉染干擾成功后,HCT8細胞的增殖能力增加;(3)穩(wěn)定干擾成功后,HCT8細胞的增殖能力增加;穩(wěn)定過表達成功后,HCT8細胞的增殖能力降低;(4)ODAM重組蛋白純化成功后,CCK