趨化因子CXCL10在小鼠暴發(fā)型肝衰竭中對NK細胞作用的研究.pdf

1、目的：在HBV引起的人類暴發(fā)型肝衰竭(fulminant hepatic failure，F(xiàn)HF)及慢加急性肝衰竭(acute-on-chronic liver failure，ACLF)中，NK細胞可以通過趨化因子/趨化因子受體的途徑向肝臟炎性中心募集，募集至肝臟的NK細胞發(fā)生活化并通過多種途徑導致肝細胞損傷。通過建立Ⅲ型鼠肝炎病毒（MHV-3）誘導的小鼠暴發(fā)性肝衰竭模型，對趨化因子受體CXCR3及其配體CXCL10在該募集活化過程中

2、所起的作用進行研究，以期為人類病毒性暴發(fā)型肝衰竭及慢加急性肝衰竭中NK細胞的作用機制提供新的研究線索。
　　 方法：1.通過向Balb/cJ小鼠腹腔注射Ⅲ型鼠肝炎病毒（MHV-3）建立暴發(fā)型肝衰竭模型；2.利用Tranwell 趨化試驗和流式細胞術分別檢測：①MHV-3感染36小時后肝細胞對各組織來源NK細胞的趨化能力；②經CXCL10中和抗體阻斷后的MHV-3感染肝細胞對NK細胞的趨化能力；③正常肝細胞對個組織來源NK細胞的趨

3、化能力；④人工重組鼠CXCL10蛋白對各組織來源NK細胞的趨化能力；3.利用流式細胞術檢測經CXCL10刺激后NK細胞的表面活化標記分子CD69的表達水平；4.利用胞內因子染色法，經流式細胞術檢測CXCL10刺激后NK細胞IFNγ和TNFα的分泌水平。
　　 結果：1.在MHV-3 誘導小鼠暴發(fā)性肝衰竭模型中，與陰性對照組相比，MHV-3感染36小時小鼠的肝細胞與人工重組鼠CXCL10蛋白在體外對脾臟、骨髓及外周血來源的小鼠NK

4、細胞均具有顯著的趨化效果（P<0.05），其中CXCL10蛋白的趨化能力遜于MHV-3感染36小時的小鼠肝細胞（P<0.05）；趨化因子CXCL10的單克隆中和抗體可在一定程度上阻斷MHV-3感染36小時小鼠肝細胞對NK細胞的趨化效果（P<0.05）；2.經CXCL10蛋白體外刺激12小時后，小鼠NK細胞的表面活化標記CD69的表達水平及細胞因子IFNγ和TNFα的分泌水平同刺激前相比無顯著差異（P>0.05）。
　　 結論：1