胞內勞森菌IPMA抗體檢測方法的建立及豬源性胞內勞森菌在小鼠體內的復制.pdf

1、豬增生性腸炎（porcine proliferative enteritis，PPE），叉叫回腸炎，發(fā)生于生長和育肥階段的豬，是一個重要的傳染性腸道疾病。它是一種傳染性腸道疾病，能引起豬生長發(fā)育阻滯，PPE由胞內勞森菌（lawsonia intracellularis，LI）引起，主要感染部位為豬的回腸和結腸，引起這些部位粘膜的增厚，進而造成養(yǎng)豬業(yè)料肉比下降而造成重大經(jīng)濟損失。胞內勞森菌是由三層波狀的胞膜結構組成，以二分裂方式在回腸上皮

2、細胞胞漿內復制，一般彎曲狀、逗點狀或S形，革蘭氏染色陰性，嚴格胞內寄生。目前國內對胞內勞森菌臨床感染情況的相關研究報道不多，有必要對LI引發(fā)的PPE進行進一步研究?，F(xiàn)將本文研究內容簡述如下:
　　1.胞內勞森菌IPMA抗體檢測方法的建立及應用
　　本試驗探索并建立了胞內勞森菌IPMA抗體檢測方法，摸索了該方法的最佳HRP-ProteinA工作濃度為1∶2000，最佳孵育時間為1h，底物顯色最佳時間為15min。該方法特異性好

3、、敏感性強、操作流程方便，適用于胞內勞森菌抗體的檢測。為LI疫苗免疫效果的評價、流行病學調查及相關檢疫提供了一種技術手段。
　　2.上海地區(qū)規(guī)?；B(yǎng)豬場PPE感染情況初探
　　本試驗對上海地區(qū)規(guī)模化養(yǎng)豬場PPE感染情況進行初步探索，臨床采集的255份臨床回腸樣本、新鮮糞便和肛門拭子中，常規(guī)PCR檢測到36份樣本呈現(xiàn)胞內勞森菌陽性（陽性率為14.1％），IPMA抗體檢測結果顯示，在采集的504份血清中，56份血清胞內勞森菌陽性

4、（陽性率11.1％），表明上海地區(qū)規(guī)?；B(yǎng)豬場豬群中普遍存在胞內勞森菌感染。結果顯示嘉定區(qū)PPE感染程度較高，松江和奉賢次之，崇明感染程度最低，這可能是由于崇明四周海域的地理環(huán)境優(yōu)勢所致。檢測結果顯示育肥豬與公母豬感染情況相比，公母豬陽性率略高于育肥豬，可能是與育肥豬的抗生素類藥物使用較公母豬高所致，也可能是公母豬生長周期較育肥豬長，感染風險大于育肥豬所致。夏季PPE病例較多，其次是春季，可以反應出胞內勞森菌感染發(fā)病的主要季節(jié)集中在春夏

5、兩季。比較兩種方法，在今后的臨床檢測中可根據(jù)需要選擇不同的方法檢測。
　　3.豬源性胞內勞森菌在小鼠體內的復制
　　本研究通過試驗，在小鼠體內成功復制豬源性胞內勞森菌，表明豬源性胞內勞森菌可以在嚙齒類動物小鼠體內繁殖，鼠類能夠因直接接觸感染豬的糞便而被自然感染。試驗組感染小鼠無死亡，表明豬源性胞內勞森菌雖然對小鼠致病，但是不具有致死性。感染胞內勞森菌的小鼠體重無明顯變化。LI在小鼠的致病部位主要在回腸及十二指腸，LI在其他臟