黃芪丹參顆粒藥對干預腎纖維化Wnt-β-catenin信號通路的實驗研究.pdf

1、目的:探討黃芪丹參顆粒藥對對腎纖維化信號通路Wnt/β-catenin的影響，并初步探討其量效關系，為臨床應用提供指導。
　　 方法:采用40只雄性SD大鼠隨機分為5組，即正常組，模型組，黃芪丹參顆粒(1∶
　　 1)藥對低劑量治療組（顆粒低劑量組），黃芪丹參顆粒(1∶1)藥對中劑量治療組（顆粒中劑量組），黃芪丹參顆粒(1∶1)藥對高劑量治療組（顆粒高劑量組）。除正常組外，其余大鼠均造成UUO模型，即麻醉后進入腹腔結扎右

2、側輸尿管。正常組和模型組予雙蒸水灌胃，其余各治療組予相應藥物灌胃治療十四天，.全自動生化分析儀檢測血清肌酐(Cr)、尿素(Urea)、半胱氨酸蛋白酶抑制劑C(Cystatin C，Cys C)24小時尿蛋白定量(24hUP)，ELISA法檢測尿α1-微球蛋白(α1-Microglobulin，α1-MG)的含量，光鏡觀察腎組織病理、膠原沉積，免疫組化法檢測腎組織內E-鈣粘蛋白(E-cadherin)、Ⅰ型膠原(ColⅠ)和α-平滑肌肌動

3、蛋白(α-SMA)的變化，Western Blot技術檢測腎組織Wnt4和β-連環(huán)蛋白(β-catenin)的表達。
　　 結果:1.黃芪丹參顆粒藥對對UUO大鼠腎臟病理的影響(1) HE染色結果正常組大鼠腎組織未見病理改變，UUO組大鼠腎組織可見腎小管上皮細胞大量萎縮空泡變性，管腔擴張或斷裂，并可見腎間質內大量炎性細胞浸潤，間質纖維化較明顯;各治療組病理變化較模型組均有明顯改善，顆粒中、高劑量組HE評分較顆粒低劑量組明顯減少(

4、P＜0.05)。(2) Masson染色結果正常組腎組織膠原沉積不明顯，模型組可見腎小囊、腎小管基膜及間質出現明顯的絲狀淡藍色膠原沉積，各治療組膠原沉積較模型組均明顯減輕。顆粒高劑量組Masson評分較顆粒低劑量組明顯減少(P＜0.05)。
　　 2.黃芪丹參顆粒藥對對UUO大鼠腎功能的影響模型組大鼠血清Cr和Urea水平顯著高于正常組，顆粒中劑量組血清Cr水平和各治療組Urea水平顯著低于模型組，顆粒高劑量組血Urea水平顯著

5、低于顆粒低劑量組(P＜0.05)。
　　 3.黃芪丹參顆粒藥對對UUO大鼠24hUP和尿α1-MG的影響模型組24hUP和尿α1-MG均顯著高于正常組，各治療組24hUP和尿α1-MG顯著低于模型組，顆粒中、高劑量組24hUP均顯著低于顆粒低劑量組(P＜0.05);各治療組之間比較尿α1-MG差異無顯著性(P＞0.05)。
　　 4.黃芪丹參顆粒藥對對UUO大鼠腎組織細胞因子的影響(1)黃芪丹參顆粒藥對可顯著升高各治療組

6、UUO大鼠腎組織E-cadherin的表達，顆粒中、高劑量組E-cadherin的表達均顯著高于顆粒低劑量組，顆粒高劑量組E-cadherin的表達顯著高于顆粒中劑量組(P＜0.05);(2)黃芪丹參顆粒藥對可顯著降低各治療組ColⅠ、α-SMA的表達，顆粒中劑量組α-SMA的表達顯著低于顆粒低劑量組，顆粒高劑量組ColⅠ、α-SMA的表達均顯著低于顆粒低劑量組(P＜0.05)。
　　 5.黃芪丹參顆粒藥對對UUO大鼠腎組織Wn

7、t4和β-catenin的影響模型組UUO大鼠腎組織Wnt4和β-catenin顯著高于正常組(P＜0.05)，黃芪丹參顆粒藥對可顯著降低各治療組Wnt4和顆粒中、高劑量組β-catenin的表達，顆粒中、高劑量組Wnt4的表達顯著低于顆粒低劑量組(P＜0.05)。
　　 結論:1.黃芪丹參顆粒藥對對UUO大鼠腎臟具有一定的保護作用，一定程度改善腎功能及腎臟病理，其機制可能與其能促進E-cadherin在UUO大鼠腎組織中的表達