齊口裂腹魚無乳鏈球菌的分離鑒定及其感染的病理學研究.pdf

1、無乳鏈球菌（Streptococcus agalactiae），又稱為B群鏈球菌，是一種典型的人-獸-魚共患病原菌，普遍存在于世界各地，嚴重威脅著人類和動物的健康。自1958年日本首次報道虹鱒感染鏈球菌的病例后，相繼有大量的關于無乳鏈球菌感染養(yǎng)殖魚和野生魚類的報道，給世界養(yǎng)殖業(yè)造成巨大的經(jīng)濟損失。2012與2013年的7～10月四川齊口裂腹龜養(yǎng)殖場流行一種臨床特征為突眼、體表出血和神經(jīng)癥狀的傳染病，在肝、腎涂片檢查中發(fā)現(xiàn)鏈狀G+球菌。從

2、自然發(fā)病魚肝、腎分離到2株形態(tài)與涂片檢查一致的G+鏈狀球菌(DML120817、YZH130830)，其在BHI平板上28℃培養(yǎng)48h，形成白色圓形、表面光滑、邊緣整齊的針尖大小菌落;根據(jù)分離菌株的形態(tài)學和生理生化檢測結果初步判定其為無乳鏈球菌（Streptococcus agalactiae）;16S rRNA基因序列分析表明，2分離株（GenBank登錄號:KF773744、KF761304）與GenBank中Sagalactiae

3、16S rDNA序列同源性達96.5％以上，在以分離菌16S rDNA序列(GenBank登陸號KF773744與KF761304)及其GenBank中同源性較高的鏈球菌16S rDNA序列構建的系統(tǒng)發(fā)育樹上，分離菌與S.agalactiae聚為一族;同時在基于無乳鏈球菌cfb基因進行的特異性PCR檢測中，分離菌均為陽性。
　　對自然感染魚進行病理剖解觀察其眼觀病變，同時取心、肝臟、腎臟、脾臟、腸、腦、肌肉和鰓等組織，10％甲醛溶

4、液固定，常規(guī)石蠟切片，觀察無乳鏈球菌感染造成的病理損傷。結果表明，感染魚主要表現(xiàn)突眼、體表出血和神經(jīng)癥狀的臨床表現(xiàn);病理組織學觀察發(fā)現(xiàn)，S.agalactiae感染齊口裂腹魚對多組織器官都造成明顯的病理損傷，尤其是肝、腎、脾、和腦的損傷較為嚴重，表現(xiàn)為明顯的變性、壞死以及炎癥細胞浸潤，主要表現(xiàn)為肝炎、急性脾炎、間質性腎炎、腦膜腦炎、心外膜炎。
　　超微結構上，球狀的S.agalactiae侵入肝細胞、腎小管上皮細胞、腎間質、脾髓、