小麥TaAQP8抗逆功能的研究.pdf

1、水通道蛋白（Aquaporins, AQP）是MIP（major intrinsic protein）超家族中的成員，是一種膜內在蛋白，可以在細胞膜上高效的轉移和運輸水分子。該成員分子大小為23-31KD。目前幾乎所有的生物中都發(fā)現(xiàn)有水通道蛋白的存在。研究它的結構與功能，可以更好的從分子水平的角度解釋闡明生物體內水分的運輸及調控過程。植物的水通道蛋白除了可以運輸小的水分子，也可以運輸一些其它的物質，在種子的萌發(fā)、氣孔的調節(jié)、果實的發(fā)育、

2、植物的光合作用及環(huán)境的應答中都有非常重要的作用和意義。
　　本研究從小麥基因組中克隆了一個水通道蛋白基因TaAQP8，初步分析此基因在小麥中的表達特性及與逆境相關的功能，具體結果如下：
　?。?）TaAQP8基因的生物信息學分析
　　利用生物信息學的知識，在數(shù)據(jù)庫中將TaAQP8基因的EST序列進行搜索并拼接，以此序列為基礎設計特異的引物，利用PCR技術獲得了TaAQP8基因的cDNA的全長。
　　用生物信息學來

3、分析基因序列，此基因具有完整的開放閱讀框，基因全長為909bp，分析序列特征，表明該基因屬于MIP超家族的PIP1家族；對于水通道蛋白家族而言都具有6個α-螺旋，保守的HINPAVTFG序列以及2個NPA結構區(qū)；進化樹分析結果顯示，TaAQP8基因的同源性與ZmPIP1-1和HvPIP1-1是最高的。
　?。?）TaAQP8基因在小麥中的表達分析
　　通過實時熒光定量PCR技術檢測TaAQP8基因在干旱處理下的表達分析，在脫

4、水處理2h時該基因的表達量最大，在PEG處理6h時該基因的表達量最大，可以初步推斷TaAQP8參與植物的失水過程，輕微的脫水處理可以誘導此基因上調表達，初步推斷小麥TaAQP8基因受到干旱脅迫的誘導表達。
　?。?）TaAQP8轉基因煙草對干旱脅迫的耐受性分析
　　將TaAQP8基因克隆到pCAMBIA1304植物表達載體，利用農桿菌轉化的方法獲得T2代的轉基因煙草植株。表型分析的結果表明，過表達TaAQP8能夠增強轉基因煙

5、草對干旱脅迫的耐受能力。生理分析結果表明，在干旱脅迫處理條件下，轉基因煙草植株比野生型具有較高的相對水含量（Relative water content，RWC），較低的離子滲漏（Ion leakage，IL）、較低的丙二醛（Malondialdehyde，MDA）含量。以上結果均表明，過表達TaAQP8使轉基因植株能更好的對抗干旱所致的脅迫損傷。
　　（4） TaAQP8轉基因煙草對滲透脅迫的耐受性分析
　　分析在高滲的M