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文檔簡介
1、目的:通過滋陰填髓益腦法對局灶性腦缺血大鼠行為、腦組織形態(tài)學和神經生化標志物的實驗研究,揭示滋陰填髓益腦法對大鼠局灶性腦缺血—再灌注的作用及其機理。
方法:1.選用雄性Sprague-Dawley大鼠,SPF級,體重250g-280g,按隨機化原則,分為5組,分別為假手術組、模型組、滋陰填髓益腦方組、補陽還五湯組、尼莫地平組,每組15只。假手術組做動脈分離手術,不栓塞大腦中動脈。模型組,滋陰填髓益腦方組,補陽還五湯組,尼莫
2、地平組均行大腦中動脈栓塞術。滋陰填髓益腦方、補陽還五湯、尼莫地平分別按照每日70kg成人121g、80g、90mg藥量計算。大鼠大腦中動脈栓塞術后24小時開始灌胃對應組藥物,連續(xù)灌胃7天,每日一次,給藥量分別為滋陰填髓益腦方10.8g/kg,補陽還五湯7.15g/kg,尼莫地平8.0mg/kg(均以生藥量計算),假手術組和造模組分別以等量生理鹽水10ml/kg灌胃。最后一次給藥后30min斷頭取腦。
2.結果觀察,1)腦梗
3、死體積的測定;2)組織病理學觀察;3)血清T-SOD及Cu-Zn-SOD測定;4)血清丙二醛(MDA);5)Bcl-2、Bax免疫組化染色;6)神經細胞凋亡檢測(TUNEL法)。
結果:1:顯示滋陰填髓益腦方,補陽還五湯,尼莫地平均有減小梗死體積的作用,但尼莫地平該作用弱于滋陰填髓益腦方與補陽還五湯。2:腦組織病理學檢查:滋陰填髓益腦方,補陽還五湯組明顯優(yōu)于模型組;3:滋陰填髓益腦方組明顯增加T-SOD活性,降低MDA含量
4、;4:對損傷后腦組織Bcl-2、Bax表達影響:滋陰填髓益腦方組、補陽還五湯組、尼莫地平組Bcl-2表達上升明顯,Bax表達下降,Bax/Bcl-2明顯低于缺血再灌組(P均<0.01)。其中滋陰填髓益腦方組Bax/Bcl-2下降較補陽還五湯組、尼莫地平組更為明顯(p<0.01)。5:與模型組相比,填髓益腦方組、補陽還五湯組、尼莫地平組大鼠缺血側腦組織凋亡神經細胞數目顯著減少(P<0.01),三組間凋亡細胞數目無顯著性差異(P>0.05)
5、。
結論:通過本實驗發(fā)現顯示滋陰填髓益腦方能夠有效地減少缺血再灌注后的腦梗死面積,改善梗死區(qū)腦組織修復,滋陰填髓益腦方可提高模型動物血清SOD、Cu-Zn-SOD活性,表明滋陰填髓益腦方對腦組織細胞脂質過氧化損傷有顯著保護作用,滋陰填髓益腦方可明顯促進缺血皮質神經細胞Bcl-2的表達,同時也有抑制Bax表達的作用,即對Bax/Bcl-2有調低作用,因此可以推測滋陰填髓益腦法可以抑制神經細胞凋亡從而起到神經保護作用,而這種抗
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