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文檔簡介
1、本試驗以毛百合鱗片、無菌苗葉片為外植體,建立高效組織培養(yǎng)再生體系,為毛百合的育種、遺傳轉化、園林應用及生產(chǎn)等奠定理論基礎。探討了不同濃度的活性炭(AC)、蔗糖、大量元素、NAA、IBA、多效唑(PP333)、水楊酸(SA)、以及培養(yǎng)基狀態(tài)對鱗莖形成及膨大的影響,以期為毛百合引種馴化及試管微鱗莖的工廠化生產(chǎn)提供理論依據(jù)及關鍵技術。
1.以毛百合鱗片為外植體建立了組培快繁再生體系
試驗發(fā)現(xiàn)消毒處理采用75%酒精和2%次氯
2、酸鈉滅菌12min最佳;中層鱗片為組織培養(yǎng)的最佳外植體,鱗片不同部位的誘導及分化能力由強到弱依次基部、中部、頂部;單因子試驗表明,6-BA與不定芽誘導和愈傷的形成有直接關系,鱗片誘導不定芽的最佳培養(yǎng)基MS+6-BA2.0mg/L分化率86.7%,分化系數(shù)4.70;愈傷誘導及分化最佳培養(yǎng)基MS+6-BA(1.0-2.0mg/L),誘導率83.3%,分化系數(shù)6.25;2,4-D(小于2.0mg/L)促進愈傷的形成及分化,但對不定芽的分化無影
3、響;雙因子試驗表明,愈傷誘導及分化的最佳培養(yǎng)基是MS+6-BA0.5mg/L+2,4-D1.0mg/L;誘導率90%,分化系數(shù)7.44;誘導不定芽的最佳培養(yǎng)基MS+6-BA0.5mg/L+NAA0.5mg/L,分化率86.7%,分化系數(shù)5.69;不定芽增殖的最佳培養(yǎng)基MS+BA1.0mg/L+NAA0.1 mg/L,增殖系數(shù)7.8。最佳生根培養(yǎng)基MS+AC0.5mg/L,生根率100%,移栽到珍珠巖基質中,成活率達85%。
2
4、.以無菌苗葉片為外植體建立再生體系
試驗發(fā)現(xiàn)葉片的誘導分化存在著顯著的位置效益,葉片的誘導分化能力由強到弱依次是基部、中部、頂部;不定芽誘導最佳培養(yǎng)基MS+NAA0.3mg/L+6-BA2.0mg/L,分化率86.7%,分化系數(shù)4.31;不定芽增殖最佳培養(yǎng)基MS+NAA0.1mg/L+6-BA2.0mg/L,增殖系數(shù)4.93,生長良好;最佳生根培養(yǎng)基1/2MS+NAA1.0mg/L和1/2MS+IBA1.0mg/L,生根率均達
5、100%。移栽幼苗成活率達82%以上。
3.鱗莖膨大試驗研究
試驗發(fā)現(xiàn)當AC濃度為1.0g/L時,鱗莖直徑增大2.50倍,鮮重828.2mg,結鱗莖率100%,新增鱗莖4.40個;當NAA濃度為1.0mg/L時,鱗莖直徑增大2.26倍,鮮重658.4mg,新增鱗莖2.60個;當IBA濃度在1.0-2.0mg/L范圍時,結鱗莖率均100%,鱗莖直徑均增大2.04倍,當IBA濃度為1.0mg/L時,新增鱗莖數(shù)2.57個,
6、當IBA濃度為2.0 mg/L時,更有利于鱗莖的膨大,鮮重675.8mg;2MS對鱗莖的形成和膨大的效果最好,鱗莖直徑增大2.37倍,鮮重696.5mg,結鱗莖率為100%,新增鱗莖3.60個;當蔗糖為90 g/L時,鱗莖直徑增大2.05倍,鮮重628.3mg,結鱗莖率100%,新增鱗莖1.37個;當PP333濃度為10mg/L時,鱗莖直增大2.20倍,鱗莖鮮重625.4mg,結鱗莖率100%。水楊酸有利于提高鱗莖的誘導率,但不利于鱗莖
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