緊密連接蛋白Claudin-4和ZO-1在火把花根保護油酸肺損傷肺通透性屏障中的機制研究.pdf

1、目的：通過觀察油酸致急性肺損傷大鼠肺組織緊密連接蛋白Claudin-4和ZO-1表達的變化及其與肺通透性屏障指標的關系，探討火把花根對緊密連接蛋白Claudin-4和ZO-1表達的影響和其可能機制，為臨床上使用火把花根治療急性肺損傷/急性呼吸窘迫綜合癥(ALI/ARDS)提供治療策略和理論依據(jù)。
　　方法：健康SD大鼠45只按照隨機對照原則分成正常對照組、急性肺損傷組(ALI組)和火把花根預防組，每組各15只。正常對照組：2ml生

2、理鹽水連續(xù)灌胃10天，每天2次，第10天灌胃后1h尾靜脈注射生理鹽水0.04ml/kg；ALI組：2ml生理鹽水連續(xù)灌胃10天，每天2次，第10天灌胃后1h尾靜脈注射油酸(0.04ml/kg)，復制大鼠ALI模型；火把花根預防組：火把花根片研磨后溶于2ml生理鹽水中，連續(xù)灌胃10天(600mg/kg·day)，每天2次，第10天灌胃后1h注射油酸；注射后4h采集大鼠肺組織，測定大鼠肺組織濕/干重比(W/D)；采集大鼠靜脈血血清、支氣管肺

3、泡灌洗液(BALF)，采用雙縮脲法測定肺通透指數(shù)(LPI)；肺組織固定包埋，行蘇木精-伊紅(HE)染色進行肺損傷評分(LIS)；采用免疫組織化學法測定緊密連接蛋白Claudin-4和ZO-1的表達及定位，觀察急性肺損傷后上述蛋白含量的變化及火把花根對上述蛋白表達的影響。
　　結果：大體觀察正常對照組肺組織未見明顯異常；ALI組肺組織腫脹，表面廣布出血點；火把花根預防組肺組織輕度腫脹。光鏡下觀察正常對照組肺泡上皮組織結構完整，肺泡腔

4、及肺間質未見明顯病理改變；ALI組肺泡壁欠完整，肺間質毛細血管擴張，肺泡腔內可見大量炎癥細胞浸潤，紅細胞滲出，肺泡間質明顯水腫；火把花根組改變較 ALI組明顯減輕。ALI組LIS較正常對照組明顯升高(P<0.01)，火把花根組LIS明顯低于ALI組(P<0.01)，但仍高于正常對照組(P<0.05)。ALI組W/D和LPI分別較正常對照組、火把花根組明顯升高(P<0.05)，火把花根組 W/D高于正常對照組(P<0.01)，但火把花根組

5、LPI與正常對照組無明顯差異。緊密連接蛋白Claudin-4在正常對照組大鼠肺泡上皮細胞胞膜表達，胞漿也有少量表達。急性肺損傷組累積光密度值(IOD)顯著低于正常對照組及火把花根組(P<0.01)，火把花根組IOD值較正常對照組升高(P<0.05)。ZO-1在正常對照組大鼠肺泡上皮細胞胞漿大量表達。急性肺損傷組IOD值明顯低于正常對照組及火把花根組IOD值(P<0.01)，火把花根組IOD值較正常對照組升高(P<0.05)。