丙酮酸乙酯對H2O2處理的SH-SY5Y細胞保護作用及其機制探討.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:觀察過氧化氫H2O2誘導的擬帕金森病細胞損傷模型中,丙酮酸乙酯EP是否對其具有保護作用;并探討此保護作用的可能機制。
　　方法:過氧化氫處理人神經母細胞瘤SH-SY5Y模擬帕金森病細胞損傷模型。首先采用MTT方法檢測細胞活力水平;免疫熒光法檢測細胞內活性氧水平;免疫印跡western blotting法檢測Bcl-2和Bax含量,分析其比值;最后用Hoechst33258對細胞進行染色,觀察正常對照組和H2O2處理組細胞核的

2、形態(tài)變化。
　　結果:MTT檢測細胞活力發(fā)現(xiàn),過氧化氫處理細胞24小時后能夠顯著降低細胞活力水平,對神經細胞有顯著毒性作用。而丙酮酸乙酯可以有效的提高這種被損傷細胞活力。0.1-5mM濃度的丙酮酸乙酯對細胞沒有明顯損傷作用。細胞內活性氧水平檢測發(fā)現(xiàn),H2O2處理組細胞內氧化水平明顯升高,而丙酮酸乙酯EP能明顯減少這種氧化反應。western blotting檢測發(fā)現(xiàn),H2O2處理組細胞內Bcl-2表達下降,而Bax表達升高。而加入

3、EP后,Bcl-2和Bax呈相反改變,Bcl-2/Bax比值上升。Hoechst33258染色的細胞凋亡形態(tài)學觀察發(fā)現(xiàn),與對照組相比,過氧化氫處理組細胞呈現(xiàn)熒光強度增強、核固縮,細胞數(shù)目明顯減少;EP治療后,發(fā)生凋亡細胞數(shù)目較少。
　　結論:過氧化氫處理人神經母細胞瘤SH-SY5Y后細胞發(fā)生了生化和形態(tài)學的改變,并導致凋亡。而丙酮酸乙酯可以顯著減輕這種改變。說明丙酮酸乙酯可以保護過氧化氫對SH-SY5Y產生的毒害作用。其機制可能是

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