異丙酚復合淺低溫對大鼠腦創(chuàng)傷后神經(jīng)細胞凋亡的影響.pdf

1、背景和目的：腦創(chuàng)傷后繼發(fā)損傷可造成腦組織結(jié)構(gòu)與功能的進一步損傷，是導致顱腦損傷病人死亡或功能障礙的重要原因之一。神經(jīng)細胞凋亡是腦創(chuàng)傷后細胞死亡的重要原因之一，減少腦創(chuàng)傷后細胞凋亡，有利于患者的恢復提高生存質(zhì)量。本實驗通過觀察異丙酚復合淺低溫治療后Bax及Bcl-2mRNA水平和蛋白表達的變化，探討異丙酚復合淺低溫對大鼠腦創(chuàng)傷后神經(jīng)細胞凋亡的影響。 方法：采用Feeney's腦創(chuàng)傷模型。健康雄性SD大鼠隨機分為5組：假手術(shù)組(S)

2、、模型組(M)、淺低溫組(H)、異丙酚組(P)、異丙酚復合淺低溫組(PH)，每組分24小時和48小時兩個時間點，每個時間點各8只動物。S組，只顱骨開窗不致傷；M組，制作大鼠腦創(chuàng)傷模型；H組，創(chuàng)傷15分鐘后，采用物理降溫法，大鼠體溫控制在32～34℃(肛溫)，維持3小時；P組，創(chuàng)傷后立即按50mg/kg腹腔注射異丙酚，一小時后追加全量。H組，既控制性降溫，又腹腔注射異丙酚。腦創(chuàng)傷后采用干濕重法測量大鼠腦水含量，逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(RT-P

3、CR)技術(shù)來檢測Bcl-2和Bax在mRNA水平變化。另取80只大鼠，分組同上，采用原位缺口末端標記(TUNEL)法檢測創(chuàng)傷皮層周圍神經(jīng)細胞凋亡情況，采用免疫組化技術(shù)來檢測Bcl-2和Bax蛋白表達的變化。 結(jié)果：(1)大鼠腦創(chuàng)傷后傷側(cè)24h、48h腦水含量明顯增加，異丙酚復合淺低溫能顯著降低腦水含量；(2)S組偶見TUNEL陽性細胞表達；而M組創(chuàng)傷灶周圍TUNEL陽性細胞數(shù)目顯著增多；與M組比較，H組、P組TUNEL細胞數(shù)目明

4、顯降低(p＜0.01)；與M、H、P三組分別比較，異丙酚復合淺低溫組TUNEL陽性細胞數(shù)均顯著降低(p＜0.01)；(3)S組可見大量Bcl-2蛋白免疫陽性細胞；M組Bcl-2陽性細胞數(shù)目明顯減少；與M組比較，H組、P組Bcl-2蛋白免疫陽性細胞明顯增加(p＜0.05)，異丙酚復合淺低溫組顯著增加(p＜0.01)；(4)S組皮層可見散在Bax蛋白免疫陽性細胞；而在M組，Bax陽性細胞數(shù)目顯著增加；與M組比較，H組、P組Bax陽性細胞數(shù)目

5、明顯減少(p＜0.05)；與M組比較，異丙酚復合淺低溫組Bax陽性細胞顯著減少(p＜0.01)，而和P組、H組比較，也明顯減少(p＜0.05、p＜0.01)；(5)S組可見Bcl-2mRNA表達；而M組Bcl-2mRNA表達顯著減少(p＜0.01)；與M組比較，H組、P組Bcl-2mRNA明顯增加(p＜0.05)，PH組Bcl-2mRNA表達顯著增加(p＜0.01)；(6)S組可見很少量BaxmRNA表達；而在M組BaxmRNA水平顯著

6、增加；和M組比較，H組、P組BaxmRNA水平明顯降低(p＜0.05，p＜0.01)；PH組BaxmRNA表達比M組顯著降低(p＜0.01)；而和P組、H組比較也明顯降低(p＜0.05，p＜0.01)。 結(jié)論： (1)腦創(chuàng)傷后大鼠腦水含量增加，創(chuàng)傷灶周圍凋亡神經(jīng)細胞顯著增加，BaxmRNA水平和蛋白表達明顯升高，Bcl-2mRNA水平和蛋白表達明顯降低。(2)異丙酚能能降低創(chuàng)傷后腦水含量，并顯著減少腦創(chuàng)傷后神經(jīng)細胞凋亡的