真菌誘導白樺三萜積累的營養(yǎng)生理和分子機制的初步研究.pdf

1、本論文以產三萜的白樺懸浮細胞為試驗材料，將從白樺樹皮中分離出的內生真菌擬莖點霉屬（Phomopsis）制備成誘導子，添加到白樺懸浮培養(yǎng)體系中，從營養(yǎng)生理和蛋白組學水平探索真菌誘導白樺三萜合成的機制，這將為從蛋白組學方面揭示真菌誘導次生代謝物的積累提供參考依據。主要研究結果如下:
　　1.真菌誘導后白樺懸浮細胞中營養(yǎng)物質的變化研究
　　在真菌誘導子誘導處理的10d內，白樺細胞的干重、三萜含量和三萜產量隨著處理時間的增加表現(xiàn)為逐

2、漸降低趨勢，其中，白樺三萜含量和三萜產量均于真菌誘導子誘導1d后達到最高，分別為21.98 mg·g-1和123.82g·L-1，約為對照的2倍。
　　分析真菌誘導1d～10d后白樺懸浮細胞中可溶性糖、可溶性蛋白、碳氮比和氨基酸與三萜合成的關系。結果表明，白樺懸浮細胞中可溶性總糖含量、葡萄糖含量和C/N在真菌誘導后第1d的增加幅度達到最高，分別增長了146.93％、84.54％和906.96％，可溶性蛋白和蔗糖含量卻在真菌誘導后第

3、1d的降低幅度最大，分別降低了75.48％和18.62％，而對果糖含量影響不大。氨基酸組分中除組氨酸、賴氨酸和胱氨酸對真菌誘導子的響應程度不顯著外，真菌誘導增加了氨基酸總量和其他氨基酸的含量，但其增長幅度不同。進一步通過相關性分析表明，可溶性總糖、葡萄糖含量、C/N、谷氨酸和組氨酸含量與三萜含量的相關性達到顯著水平，并且表現(xiàn)出真菌誘導增加了他們間的相關程度。由此可見，真菌誘導后白樺三萜的合成可能與細胞內增加的C/N、谷氨酸和組氨酸有關。