血清轉化生長因子β-,1-(TGF-β-,1-)的表達與肺放射性損傷的相關性研究.pdf

1、中國醫(yī)科大學碩士學位論文血清轉化生長因子β(TGFβ)的表達與肺放射性損傷的相關性研究姓名：姚鴻民申請學位級別：碩士專業(yè)：腫瘤學指導教師：李光20040401實驗組鼠于照射后觀察大鼠的呼吸頻率，照射前及照射后第2和第4周時，分別經(jīng)大鼠尾靜脈取外周血200—300p1，于4。C下2000rpm離心10分鐘，取上清液，一70℃低溫冰箱內保存，待檢。空白對照組也于相應時間時，觀察呼吸頻率并取外周血，待檢。動物照射方法：大鼠麻醉采用2％戊巴比妥

2、鈉腹腔內注射麻醉，用藥劑量為50rag／kg。用自行設計的大鼠固定架將大鼠固定，用射線能量為6MV的x線進行外照射。源皮距(SSD)1米，劑量率為2Gy／min，照射野面積為2515cm，包括全部右肺在射野內。TGF—p，的測定：采用雙抗體夾心ELISA法檢測血清TGF—p，含量。具體操作步驟如下：(1)提前30分鐘從冰箱中取出試劑盒及樣品，平衡至室溫；濃縮洗滌液用雙蒸水稀釋，標準品及質控用標準品稀釋液及質控稀釋液稀釋，(2)每孔加入1

3、00出樣品或不同濃度標準品或質控，(3)每孔加入400p1PBS液，重復洗板3次，每次均需在吸水紙上拍干，(4)每孔加入1001xlTGF—B，單抗BAF_240，室溫下孵化20分鐘，甩干液體，每孔加入400txlPBS液，重復洗板3次，每次均需在吸水紙上拍干，(5)每孔加入1001xl底物A、B(各501x1)混合液，避光室溫20—25分鐘，每孔加入lOOp1終止液，混勻后30分鐘內于酶標儀450nm處讀取結果。統(tǒng)計學方法：照射前、后

4、血清中TGFB，平均水平用iS表示，兩樣本均數(shù)用t檢驗，多個樣本均數(shù)用F檢驗，統(tǒng)計處理采用SPSSll5軟件包。結果1放射損傷臨床表現(xiàn)大鼠照射后，肺損傷的癥狀主要表現(xiàn)為呼吸急促和呼吸頻率增快。其中10Gy組表現(xiàn)不明顯，呼吸頻率升高較輕，且出現(xiàn)時間較晚。而20Gy組、30Gy組表現(xiàn)明顯，呼吸頻率升高較早。放射損傷的程度與照射劑量成正比，即照射量大者癥狀出現(xiàn)早，持續(xù)時間長，損傷表現(xiàn)明顯。而放射劑量小者損傷表現(xiàn)較輕。2血清標本TGFB。的測定