光譜核型分析技術(shù)在染色體異常診斷中的應(yīng)用研究.pdf

1、如何對(duì)細(xì)小或復(fù)雜的染色體異常做出準(zhǔn)確的核型分析一直是困擾細(xì)胞遺傳學(xué)診斷技術(shù)人員的難題之一。傳統(tǒng)的染色體顯帶核型分析由于其分辨率較低，往往難以對(duì)復(fù)雜易位做出準(zhǔn)確判斷，而且操作費(fèi)時(shí)費(fèi)力。FISH與顯帶技術(shù)相比具有簡(jiǎn)便、快速、特異性高等優(yōu)點(diǎn)，但是FISH技術(shù)往往要建立在已知的核型分析基礎(chǔ)上，對(duì)沒(méi)有任何可以確定的條帶模式的未知染色體異常，檢測(cè)就變得十分困難。在FISH技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來(lái)的SKY技術(shù)通過(guò)5種不同的熒光素及其組合分別標(biāo)記24種人類染

2、色體涂染探針，可以通過(guò)一次雜交反應(yīng)同時(shí)檢測(cè)所有染色體，為復(fù)雜性染色體異常的檢測(cè)提供了可能。目前，國(guó)內(nèi)對(duì)SKY技術(shù)研究和臨床應(yīng)用還不夠全面和深入，特別是對(duì)SKY在臨床細(xì)胞遺傳學(xué)診斷方面的應(yīng)用價(jià)值缺乏系統(tǒng)而全面的評(píng)估。本工作應(yīng)用建立的SKY技術(shù)對(duì)包括復(fù)雜性和隱匿性染色體異常在內(nèi)的多個(gè)中期染色體樣本進(jìn)行診斷，研究其臨床應(yīng)用的最適范圍，以及如何與其他技術(shù)相結(jié)合對(duì)復(fù)雜性染色體異常進(jìn)行有效分析，從而為建立有序的臨床診斷規(guī)范提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 第

3、一部分光譜核型分析技術(shù)在染色體異常診斷中的應(yīng)用 目的:建立穩(wěn)定的光譜核型分析技術(shù)，并評(píng)價(jià)其在染色體異常診斷中的應(yīng)用價(jià)值。 方法:應(yīng)用光譜核型分析技術(shù)分別對(duì)22例G-顯帶診斷為“正常”、“平衡易位”、“不平衡易位”以及“標(biāo)記染色體”的外周血或羊水細(xì)胞染色體樣本樣本進(jìn)行檢測(cè)，并與G-顯帶診斷結(jié)果進(jìn)行比較。 結(jié)果:所建立的光譜核型分析技術(shù)不但成功地對(duì)全部15例G-顯帶診斷結(jié)果為正常或平衡易位的樣本進(jìn)行了正確診斷，而且對(duì)

4、G-顯帶無(wú)法識(shí)別的6例外周血樣本的衍生染色體片段和1例羊水樣本的標(biāo)記染色體亦明確了來(lái)源。 結(jié)論:光譜核型分析技術(shù)對(duì)染色體異常的診斷具有很高的敏感性和特異性，并且在明確傳統(tǒng)核型分析技術(shù)不能分析的標(biāo)記染色體或衍生染色體片段的來(lái)源方面具有重要應(yīng)用價(jià)值。認(rèn)為對(duì)于G-顯帶診斷困難或無(wú)法分析的病例，SKY可以提供更多的信息，有著獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)；而對(duì)于G-顯帶可以明確診斷的病例，SKY技術(shù)優(yōu)勢(shì)不明顯。 第二部分光譜核型分析聯(lián)合熒光原位雜交

5、技術(shù)對(duì)不平衡易位家系的研究 目的:進(jìn)一步研究(X：1)不平衡易位患者在成年期的基因型一表型的關(guān)系們認(rèn)為應(yīng)用SKY對(duì)染色體異常進(jìn)行篩查并用FISH技術(shù)進(jìn)行驗(yàn)證是對(duì)G-顯帶技術(shù)未能明確的復(fù)雜性染色體異常進(jìn)行分析的有效途徑。 方法:病例報(bào)道。 結(jié)果:本研究聯(lián)合應(yīng)用SKY技術(shù)和亞端粒FISH技術(shù)對(duì)一個(gè)不平衡易位樣本t(X；1)(q27；q31)進(jìn)行了明確診斷，并首次描述了這種不平衡易位在成人期的臨床特征。該患者主要存在卵