短尾蝮蛇毒磷脂結合抗凝蛋白的生物化學、藥理學和分子生物學的研究.pdf

1、目的:蛇毒是一種含有多種蛋白和多肽的混合物，其中不少毒性蛋白影響凝血功能(血液凝固、纖溶系統(tǒng)和血小板聚集)，這些毒素是蛋白質或酶。如L-氨基酸氧化酶、磷脂酶A、核苷酸酶、類凝血酶、纖溶酶、蛋白酶C：而有些是非酶蛋白，如解離素、Carinatin、Trigramin。它們的各種有效成分和性質也被廣泛研究。然而，蛇毒中所含磷脂結合抗凝蛋白的研究尚未見報道。本課題的目的旨在從短尾蝮蛇毒中分離純化出磷脂結合抗凝蛋白(Phospholipid-b

2、inding anticoagulation protein(PBAP)，并對它的一些生化、物理性質；對動物體內外的抗凝血、抗血栓、血液流變學作用；一般藥理和毒理；作用機制以及基因克隆進行研究。從而通過生物學的方法得到電泳純、有活性的磷脂結合抗凝蛋白，為制備安全、有效的新型溶栓制品打下良好的基礎。 結論: 從短尾蝮蛇毒中分離純化出的磷脂結合抗凝蛋白是二聚體，相對分子質量為24.0×1O<,3>(非還原)和14.6×10<

3、,3>(還原)。等電點為pH 5.2。得率約占蛇毒總重量的0.421％。該蛋白具有精氨酸酯酶活性，能夠與磷酯結合。能顯著地延長活化部分凝血活酶時間和稀釋的羅氏蝰蛇毒時間，減少組織凝血酶抑制試驗(TTI)試劑的磷脂濃度，能加速其抗凝作用，它干擾Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ因子活性，可能通過內源性途徑抑制凝血過程。它明顯降低家兔全血粘度和紅細胞壓積。對家兔體外血栓；半體內血栓；肺動脈栓塞和大白鼠靜脈血栓具有明顯的抗栓作用。它不影響實驗動物的神經系統(tǒng)、循環(huán)