SCGE試驗檢測十二種食品添加物遺傳毒性的研究.pdf

1、目前，食品化學污染，食品添加劑的濫用以及非法在食品中添加化工產(chǎn)品的事件屢見不鮮。本研究根據(jù)構建食品中化學污染物毒性快速檢測體系的需求，開展了采用細胞毒性方法(MTT法)和單細胞凝膠電泳(SCGE)方法檢測食品添加物毒性的方法建立與應用的研究。試驗采用中國倉鼠肺成纖維細胞(CHL細胞)對八種食品添加劑(日落黃、檸檬黃、莧菜紅、亮藍、復合綠、復合紫、糖精鈉、苯甲酸鈉)和三種常見食品非法添加物(甲醛、硼砂、硫脲)的細胞毒性、致DNA損傷及染色

2、體畸變進行了研究和比較。 莧菜紅、日落黃、復合綠、亞硝酸鈉隨劑量增高，對CHL細胞生長抑制作用明顯增強，細胞毒性較大；而亮藍、復合紫、檸檬黃、苯甲酸鈉在不同劑量對CHL細胞生長抑制作用差別不大，細胞毒性不明顯；食品非法添加物甲醛、硫脲、硼砂則表現(xiàn)出極強的細胞毒性。除甲醛外，11種受試物的劑量與細胞生長抑制率明顯相關(P<0.05)。日落黃、亮藍、糖精鈉和苯甲酸鈉的劑量與細胞生長抑制率相關系數(shù)達0.9以上。觀察受試物對CHL細胞生

3、長半數(shù)抑制濃度(IC<,50>)，以甲醛(0.01 μl/L)、復合綠(0.37g/L)和日落黃(0.78/L)毒性較大。該細胞毒性方法能反映受試物的毒性強度，但這些受試物的IC50與其相應的整體動物急性毒性試驗的LD<,50>比較，似乎沒有明顯相關。 在采用SCGE檢測受試物對DNA損傷能力中，發(fā)現(xiàn)全部受試物隨著劑量增加細胞拖尾率也隨之上升，有明顯的劑量.反應關系。日落黃(0.037g/L)、檸檬黃(0.1g/L)、莧菜紅(1

4、0g/L)、亮藍(10 g/L)、復合綠(0.1g/L)、復合紫(0.1g/L)、苯甲酸鈉(20g/L)亞硝酸鈉(0.1g/L)、糖精鈉(0.737 g/L)、甲醛(0.2 μl/L)、硼砂(0.027gm)和硫脲(0.737g/L)在各自相應劑量所引起的細胞DNA拖尾率明顯高于空白對照組(p<0.05)。彗星尾光密度隨著細胞DNA損傷斷裂增多，亮度增加。日落黃(0.037g/L)、檸檬黃(0.5g/L)、莧菜紅(1gin)、復合綠(0

5、.01g/L)、糖精鈉(0.027 gm)、硼砂(0.027g/L)硫脲(0.027g/L)在各自相應劑量所產(chǎn)生的細胞DNA尾部光密度明顯高于空白對照組(p<0.05)。對日落黃、檸檬黃、莧菜紅、亮藍、復合綠、復合紫和亞硝酸鈉進行的染色體畸變試驗也反映了這些受試物具有一定毒性，各受試物的SCGE拖尾率與染色體畸變率有密切的線性相關(r=0.807，p<0.05)。由于彗星試驗較染色體畸變試驗敏感，用彗星試驗預測受試物的遺傳毒性是可行的。