牙髓牙本質復合體組織學染色方法的改良.pdf

1、牙髓-牙本質復合體(pulp-dentin complex)是牙齒的基本組成部分，同時也是執(zhí)行牙齒生理功能的重要組織結構[1]。而牙髓疾病是困擾人類的常見病、多發(fā)病，其發(fā)生發(fā)展過程均與牙髓-牙本質復合體組織結構的改變有關。因此，越來越多的學者關注對于牙髓-牙本質復合體的研究。在目前的研究技術中，大多是通過組織切片染色、血管造影等，之后光鏡或電鏡下觀察成像。由于牙髓被致密的硬組織包圍，觀察其三維立體形態(tài)難度較大，而且在同一個體中，對于成牙

2、本質細胞、神經、血管這三種組織的具體分布及空間走向的認識迄今并不透徹。本實驗從了解牙髓-牙本質復合體中重要組織結構的形態(tài)學特征入手，分別采用Holmes還原銀染色法配合改良HE染色及過碘酸-銀-烏洛托品(Periodic Aeid-Silver-Methenamine，PASM)配合蘇木素-伊紅(Hematoxylin-Eosin，HE)染色，光鏡下觀察牙髓-牙本質復合體中重要組織結構的分布、走向及不同組織間的相互關系，以期能夠對牙髓-

3、牙本質復合體的主要組織結構有一個統(tǒng)一的認識，從而在形態(tài)學上進一步豐富牙髓-牙本質復合體的基礎理論。 目的：從形態(tài)學的研究著手，通過系列實驗，探討進一步認識牙髓-牙本質復合體組織形態(tài)特征的方法，深入了解牙髓-牙本質復合體內部復雜的組織結構特點，為臨床牙髓病治療提供理論依據。 方法：選擇因正畸治療拔除的無齲前磨牙，處理后暴露牙本質，經10％福爾馬林固定，8％硝酸脫鈣常規(guī)組織切片。分別采用Holmes還原銀染色法配合改良HE染

4、色及改良過碘酸-銀-烏洛托品(PASM)染色套染蘇木素-伊紅(HE)染色，光鏡下觀察牙髓-牙本質復合體的組織結構。 結果：Holmes還原銀染色法結果顯示，光鏡下神經纖維組織呈黑色，可見牙髓中神經纖維組織多分布于小血管、細胞周圍，神經纖維末梢分布均勻、形態(tài)規(guī)則、粗細均勻；通過HE復染，染色背景呈淺紅色，可分辨出牙髓血管的走行方向，細胞形態(tài)大致可見。改良PASM染色配合HE復染后的切片背景呈淺紅色，神經纖維組織呈黑色網狀結構，牙髓

5、端有螺旋狀神經纖維穿過成牙本質細胞層進入前期牙本質，前期牙本質內有一定數量呈彎曲狀的神經纖維分布，走行方向與牙本質小管基本一致；牙髓內的血管、細胞亦清晰可見。 結論：通過Holmes還原銀染色法配合改良HE染色及改良PASM染色結合HE復染，均可獲得牙髓微血管、細胞、神經組織多重結構的清晰圖像；相比較于Holmes還原銀染色法，改良PASM染色法對牙本質神經的成像有更強的特異性，在神經染色的應用方面優(yōu)勢明顯；而Holmes還原銀