Snail、E-CD在大腸癌中表達臨床意義的研究.pdf

1、大腸癌是我國常見的惡性腫瘤之一, 其發(fā)病率有逐年上升的趨勢.盡管近年來以手術治療的綜合治療使大腸癌患者的預后有所改善,但術后5年生存率仍徘徊在50～60﹪左右.腫瘤的浸潤和轉移是惡性腫瘤的兩大主要特點,也是患者復發(fā)和死亡的主要原因.因此,闡明影響大腸癌患者預后及與腫瘤浸潤和轉移密切相關的分子生物學行為,預測大腸癌的浸潤和轉移潛能,從而指導臨床治療,采取更積極有效的治療,可望減少術后復發(fā)和轉移、提高生存率的目的. 腫瘤浸潤是腫瘤細

2、胞與細胞外基質相互作用的過程,它包括細胞粘附、基質降解和細胞運動三個步驟,其中細胞一細胞間粘附的破裂是腫瘤轉移復雜過程的第一步.近年來發(fā)現(xiàn)的粘附分子主要有整合素類(Integrins)、CD44、鈣粘附蛋白類(Cadherins)、免疫球蛋白(Ig)超家族、凝集素類(Selections)等.表皮-鈣粘附素(E-cadherin,E-CD)是一類鈣依賴性同種上皮細胞親和性的粘附分子,是維持上皮細胞結構完整性和極性的跨膜糖蛋白,普遍存在于

3、上皮細胞、間胚層細胞和胎盤等處.E-CD位于細胞邊緣,特別是細胞一細胞粘附區(qū)域,如果缺乏E-CD的表達,細胞間就不能相互聚集和粘附.研究表明,E-CD在多種人類惡性腫瘤中表達低下,且E-CD的表達下降與腫瘤的浸潤、轉移和預后密切相關.Snail是鋅指轉錄因子,主要是以其鋅指區(qū)域與E-CD啟動子中Epal元件的E盒結構主鏈上的CANNTG序列結合而發(fā)揮調節(jié)E-CD的作用,抑制E-CD的表達,Snail是腫瘤進展過程中浸潤的一個重要的調節(jié)子

4、,與E-CD的表達成負相關,是一種促進腫瘤浸潤和轉移的因子,大量的體內實驗結果表明:Snail在多種人類惡性腫瘤中表達增高,且Snail的高表達與腫瘤不良的臨床病理特征密切相關.然而,到目前為止,國內尚未見有關E-CD、Snail表達與大腸癌侵襲、轉移和預后關系的研究報道. 本研究采用免疫組化染色方法(EnVision),檢測E-CD、Snail在大腸癌組織中的表達,旨在探討E-CD、Snail與大腸癌浸潤、轉移和預后的關系.評

5、價E-CD、Snail在預測大腸癌浸潤、轉移潛能及預后中的臨床意義,從而為大腸癌的綜合治療提供有參考價值的分子生物學指標. 本研究收集1988-2001年期間浙江省人民醫(yī)院肛腸外科行大腸癌手術治療病例的組織標本142例為實驗組,另選擇來源于正常大腸粘膜標本30例和大腸腺瘤標本30例為對照組.全部病例均經手術和病理檢查證實.隨訪時間為4～142個月,中位隨訪時間55.04個月.大腸癌分期按Duke's法分期.所有標本均經常規(guī)10﹪

6、福爾馬林固定,石蠟包埋.每例選擇有代表性的組織蠟塊行連續(xù)切片,分別行HE染色和免疫組織化學染色,觀察E-CD、Snail的表達情況. 本研究數(shù)據(jù)統(tǒng)計學處理方法采用SPSS-11.5統(tǒng)計軟件包進行統(tǒng)計學處理,計數(shù)資料用x<'2>檢測或:Fisher's確切概率法,等級分組資料用秩和檢驗;單因素生存率計算用壽命表法,生存率之間的比較用Kaplan-Meier檢測;多因素生存率分析用Cox's回歸分析.p<0.05為有顯著性差異.

7、 研究結果: 一、E-CD 1.30例正常大腸粘膜上皮E-CD染色,3例(10﹪)中度陽性,27例(90﹪)為強陽性.30例大腸腺瘤中,1例(3.33﹪)染色呈陰性,10例(33.33﹪)呈中度陽性,19例(63.33﹪)呈強陽性.142例大腸癌中,30例(21.13﹪)染色陰性,53例(37.32﹪)呈中度陽性,59例(41.55﹪)呈強陽性.說明E-CD在大腸癌中的表達低于正常粘膜上皮和大腸腺瘤.正常粘膜上皮組、

8、腺瘤組、大腸癌組兩兩相比,均有明顯差異(p<0.05). 2.E-CD表達與腫瘤分化程度、浸潤深度、靜脈、淋巴管、淋巴結侵犯與否、Dukes'分期狀況密切相關(p<0.05),而與年齡、性別、腫瘤大小、腫瘤組織學類型無關(p>0.05). 3.E-CD陰性表達組的大腸癌患者術后1、3、5年的生存率分別為86.67﹪、53.33﹪、33.33﹪,E-CD中度陽性表達組的大腸癌患者術后1、3、5年生存率分別為92.45﹪、6

9、0.38﹪、45.28﹪,E-CD強陽性表達組大腸癌患者術后1、3、5年生存率分別為100﹪、76.27﹪、49.15﹪,表明E-CD陰性表達的大腸癌患者預后明顯較差(p=0.000). 4.在45例Dukes'B期的大腸癌患者中,7例E-CD染色為陰性,其1、3、5年生存率分別為85.71﹪、57.14﹪、0.00﹪,38例E-CD染色為中度陽性或強陽性,其1、3、5年生存率分別為97.37﹪、65.79﹪、39.47﹪.說明

10、在Dukes'B期大腸癌,E-CD陰性表達患者的預后明顯較陽性表達者為差(p=0.0000). 二、Snail 1.正常大腸粘膜上皮Snail染色多呈陰性表達,30例中28例(93.33﹪)染色呈陰性,只有2例(6.67﹪)呈中度陽性,沒有強陽性表達者.30例大腸腺瘤中22例(73.33﹪)染色呈陰性,8例(26.67﹪)呈中度陽性,也沒有強陽性表達者.而在142例大腸癌中,呈陰性表達68例(47.89﹪),60例(42

11、.25﹪)染色呈中度陽性,14例(9.86﹪)呈強陽性.說明Snail在大腸癌中的表達明顯高于正常粘膜上皮和大腸腺瘤.正常大腸粘膜上皮組、腺瘤組、大腸癌組兩兩相比均有顯著差異(p<0.05). 2.Snail表達與腫瘤病理組織類型、分化程度、浸潤深度、靜脈、淋巴管、淋巴結侵犯與否、Dukes'分期明顯相關(p<0.05),而與年齡、性別、腫瘤大小無相關性(p>0.05). 3.Snail陰性表達組大腸癌患者,術后l、3、

12、5年生存率分別為100﹪、70.59﹪、47.06﹪,Snail中度陽性表達組大腸癌患者,術后1、3、5年生存率分別為90﹪、56.67﹪、46.67﹪,Snail強陽性表達組的大腸癌患者,術后1、3、5年生存率分別為85.71﹪、50﹪、21.43﹪.表明Snail陽性表達的大腸癌患者預后較差.三組之間生存率差異顯著(p=0.000). 4.在45例Dukes'B期的大腸癌患者中,26例Snail染色為陰性,其1、3、5年生存

13、率分別為100﹪、69.23﹪、42.31﹪,19例Snail染色為中度陽性或強陽性,其1、3、5年生存率分別為89.47﹪、57.89﹪、26.32﹪.說明在Dukes'B期大腸癌,Snail陽性表達者的預后明顯較陰性表達者為差(p=0.0002). 三、多因素分析結果顯示:腫瘤淋巴結侵犯、Dukes分期、E-CD表達強度、Snail表達強度可預示術后生存情況(p<0.05). 結論： 1、正常大腸粘膜E-CD

14、表達為強陽性或中度陽性,而Snail以陰性為主;大腸癌組織中E-CD表達強度明顯減弱,而Snail則明顯增強. 2、E-CD和Snail染色強度與大腸癌的侵襲、轉移和預后明顯相關,E-CD表達降低和Snail表達增強的大腸癌患者病期晚、預后差. 3、Snail表達與E-CD表達之間呈負相關性. 4、Snail與E-CD的表達強度均是大腸癌患者的獨立預后指標,可預示生存. 5、在Dukes'B期大腸癌,E-