二烯丙基二硫下調(diào)calreticulin誘導人白血病HL-60細胞分化.pdf

1、目的：研究二烯丙基二硫（diallyl disulfide, DADS）下調(diào)calreticulin誘導人白血病HL-60細胞分化，探討DADS誘導人白血病細胞分化的分子機制。
　　方法：采用Giemsa染色檢測形態(tài)學的改變， siRNA、MTT、QPCR、Western blot、流式細胞術等方法研究DADS下調(diào)鈣網(wǎng)織蛋白（calreticulin, CRT）誘導人白血病細胞分化以及沉默CRT在DADS誘導人白血病細胞分化的作用

2、。
　　結果：
　　1.形態(tài)學觀察DADS對HL-60細胞的影響
　　形態(tài)學觀察顯示，1.25mg·L-1 DADS處理HL-60細胞48h、72 h后，細胞的胞漿豐富，胞核變小，核漿比例縮小。
　　2. DADS對HL-60細胞CRT表達的影響
　　QPCR檢測顯示，DADS處理HL-60細胞后，CRT可以在mRNA水平表達降低，并呈時間依賴性降低（P<0.05）。Western blot顯示，DADS處

3、理HL-60細胞后，CRT蛋白表達隨著時間延長逐漸下降（P<0.05）。
　　3.沉默CRT基因?qū)L-60細胞CRT表達的作用
　　沉默HL-60細胞CRT基因48h和72h后，CRT mRNA表達較對照組分別顯著下調(diào)(P<0.05)。而DADS處理對照組與干擾組48h和72h組后，CRT mRNA表達分別較對照組與干擾組明顯下調(diào)(P<0.05)。同時，CRT蛋白表達分別較對照組明顯降低(P<0.05)。DADS處理對照組

4、與干擾組48h和72h后，分別較處理前顯著下調(diào)(P<0.05)。
　　4.沉默CRT基因?qū)L-60細胞增殖的影響
　　MTT檢測顯示，在24、48、72、96h各時間段，與對照組相比，干擾組增殖能力呈時間依賴性明顯降低(P<0.05)。而 DADS處理對照組和干擾組后較處理前對照組和干擾組亦呈時間依賴性抑制增殖(P<0.05)。
　　5.沉默CRT基因?qū)L-60細胞CD33和CD11b表達的影響
　　流式細胞