非酒精性脂肪性肝病患者腸道菌群變化及其與禁食誘導脂肪因子、胰島素抵抗的相關性研究.pdf

1、非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease，NAFLD)是指除乙醇和其他明確的肝損害因素所致的，以彌漫性肝細胞大泡性脂肪變?yōu)橹饕卣鞯呐R床病理綜合征。根據(jù)肝內脂肪變、炎癥和纖維化的程度，將NAFLD分為單純性脂肪肝、脂肪性肝炎、脂肪性肝硬化。
　　NAFLD的發(fā)病機制目前尚未完全明確，目前研究認為NAFLD的發(fā)病與胰島素抵抗、脂代謝異常、脂質過氧化等密切相關。而隨著研究的不斷深入，有學者

2、認為腸道菌群的改變可以通過直接調控機體脂肪合成與儲存相關基因的表達，影響能量吸收和儲存，促進肥胖形成和胰島素抵抗等機制影響能量代謝[1]，參與NAFLD的發(fā)生和發(fā)展。
　　禁食誘導脂肪因子(fasting-induced adipose factor，F(xiàn)iaf)基因主要負責編碼脂蛋白脂肪酶(lipoprteinlipase，LPL)抑制因子，LPL可以水解在脂蛋白顆粒的甘油三酯，促進脂質沉積。Fiaf正是通過抑制LPL，從而抑制甘

3、油三酯循環(huán)。有研究表明在動物體內，F(xiàn)iaf可被腸道菌群調控，腸桿菌的增加可以抑制Fiaf的表達，使得LPL表達增多，導致脂質沉積，但其具體機制需進一步的研究[2,23]。也有研究表明2型糖尿病患者外周血中Fiaf減少，且與胰島素抵抗相關[24]。因此，我們就NASH患者腸道菌群的變化，及其是否與Fiaf因子、胰島素抵抗有關進行初步研究。
　　目的:檢測NAFLD患者腸道菌群的變化，測定血漿Fiaf因子的水平，分析腸道菌群與Fiaf

4、因子、胰島素抵抗的相關性，探討腸道菌群在非NAFLD發(fā)生發(fā)展中的作用。
　　方法:本研究共收集在我院門診和體檢部經(jīng)臨床、實驗室、B超確診為非酒精性脂肪型肝病患者30例（病例組），在我院門診體檢結果為健康并且愿意接受實驗的成年人30例（對照組）。NAFLD診斷標準參照2010年中華醫(yī)學會肝臟病學分會脂肪肝和酒精性肝病學組制定的非酒精性脂肪性肝病診療指南[3]。所有研究對象均除外近期使用腸道微生態(tài)制劑、酸奶、使用抗生素等可能影響腸道菌

5、群的制劑。常規(guī)測量兩組的身高、體重、腹圍，計算BMI值。選擇腸道菌群中5種具有代表性的細菌進行培養(yǎng)，分別計數(shù)病例組和對照組腸道菌群中這5種細菌的數(shù)量，用以評價腸道菌群的變化狀況。收集所有研究對象清晨空腹抽取的靜脈血血清，采用全自動生化分析儀測定血清谷丙轉氨酶(ALT)、谷草轉氨酶(AST)、總膽固醇(CHOL)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、空腹血糖(FPG)以及空腹胰島素(FINS)水平。使用平衡穩(wěn)態(tài)模型的評價法，計算胰島

6、素抵抗指數(shù)(homeostatic model assessment-insulin resistance，HOMA-IR)，評估胰島素抵抗程度。通過RT-PCR方法檢測兩組血漿中Fiaf的mRNA的表達。根據(jù)檢測結果，分析腸道菌群數(shù)量、Fiaf的含量、HOMA-IR的相關性。
　　結果:1兩組腸道菌群數(shù)量比較:與對照組相比，NAFLD組變形桿菌和腸球菌數(shù)量明顯增加(9.20±0.20vs8.73±0.41，7.70±0.55vs

7、7.18±0.36，P＜0.05)，雙歧桿菌、擬桿菌、乳桿菌數(shù)量明顯減少(8.89±0.28vs9.16±0.22,7.29±0.36 vs7.94±0.15,9.21±0.36 vs9.76±0.22, P＜0.05)。2兩組年齡、性別、BMI、腹圍比較:兩組在年齡、性別上差異無意義（P＞0.05），相比正常對照組，NAFLD組研究對象的腹圍、BMI均明顯升高(90.5±8.86vs81.67±8.89,27.42±3.14vs24.

8、22±2.37,P＜0.05)。3兩組血清學指標比較:與對照組相比，病例組ALT(37.75±29.93 vs11.17±1.72)、AST(27.96±18.99 vs10.83±1.47)、CHOL(5.17±0.80 vs4.44±0.54)、TG(2.16±1.04 vs0.94±0.41)水平明顯升高，均P＜0.05;病例組Fiaf水平明顯降低（1.21±0.05 vs1.26±0.03，P＜0.05），病例組HOMA-IR明

9、顯升高（4.91±1.21vs2.86±0.51，P＜0.05）。兩組LDL差異無統(tǒng)計學意義。4相關性分析:5種腸道菌群中只有變形桿菌數(shù)量與血清FiafmRNA表達水平呈顯著性負相關(r=-0.734，P＜0.01)，血漿FiafmRNA表達水平和HOMA-IR呈顯著性負相關（r=-0.819，P＜0.01），變形桿菌數(shù)量和HOMA-IR呈正相關（r=0.614，P＜0.01）。
　　結論:1 NAFLD患者存在腸道菌群的失調，表