復發(fā)性流產患者免疫治療前后外周血T淋巴細胞表達率的變化與治療效果的臨床觀察.pdf

1、研究背景:
　　復發(fā)性流產(recurrent spontaneous abortion，RSA)是指發(fā)生在妊娠28周之前連續(xù)3次和3次以上的自然流產，且不存在弓形蟲等生殖道感染、內分泌、子宮附件解剖異常、自身免疫功能異常，以及染色體異常等病因。自然流產是指除人為因素，由某些原因所致胚胎或胎兒從母體自動脫離的現象?，F今我國由于人們周圍環(huán)境污染輻射等的影響和生活方式的改變，使得復發(fā)性流產的發(fā)生率逐年升高。造成RSA的原因有很多，目前

2、大致可分為非免疫性和免疫性兩類。非免疫因素包括遺傳因素（包括染色體異常）、解剖結構畸形、感染因素、內分泌因素、微量元素缺乏等。免疫因素可分為兩類:自身相關型和同種免疫型，同種免疫型包括原因不明型。自身相關型具有重要作用的有抗磷脂抗體(APA)、抗精子抗體(ASA)等。同種免疫型中起重要作用的有T淋巴細胞、NK細胞等。臨床常用T淋巴細胞活化比率來表示封閉抗體，作為檢測指標。封閉抗體缺乏可視為T淋巴細胞活化比率不足。不足以使母體對胚胎等妊娠

3、組織產生免疫耐受，導致父系抗原被母體免疫系統(tǒng)識別而殺傷，使胚胎受到免疫攻擊而流產。所以對于妊娠的健康婦女，具有相當數量的調節(jié)性T淋巴細胞非常重要，可使母體對胚胎（半同種異體抗原）產生免疫耐受，發(fā)揮免疫防護作用，利于妊娠;如果外周血中調節(jié)性T淋巴細胞的數量減少，胚胎就會遭受免疫系統(tǒng)攻擊，使母體對胚胎的免疫耐受力降低，導致流產發(fā)生。現國內外研究淋巴細胞免疫療法是治療封閉抗體陰性復發(fā)性流產患者最常用的治療方法。有學者認為其可提高患者妊娠率高達

4、87％。淋巴細胞免疫療法即采用丈夫或者健康男性（第三者）的外周血，經過離心后將男方的血清淋巴細胞注入患者皮下組織，使患者被動的產生自身免疫調節(jié)，從而使外周血中的調節(jié)性T淋巴細胞的數量增加，誘導母體產生免疫耐受，當其再次妊娠時，就可以減少對胚胎半同種異體抗原的免疫攻擊，故可保護胚胎，維持妊娠。但其療效學術界有分歧，且治療過程長，治療后轉陽與未轉陽對于是否可以成功妊娠的有效率不肯定，本論文在排除復發(fā)性流產患者子宮缺如、雙側輸卵管阻塞、陰道缺

5、如等解剖因素;弓形蟲、風疹病毒、HPV等感染因素;抗心磷脂抗體陽性、抗核抗體陽性、抗甲狀腺抗體陽性等免疫因素，男方性功能障礙、先天性精子畸形等男方因素，及多囊卵巢綜合癥、卵巢早衰、高泌乳素血癥等內分泌因素等影響妊娠的因素后，對封閉抗體陰性的RSA患者主動免疫治療前、后采用流式細胞檢測儀測定外周血T淋巴細胞(CD3+、CD4+和CD8+)封閉效率，分析其變化，了解免疫治療效果，并且隨訪妊娠及保胎成功率，進一步探討免疫治療測定T淋巴細胞（C

6、D3+、CD4+和CD8+）的封閉效率在臨床上RSA中的診治價值。
　　目的:
　　1.通過觀察復發(fā)性流產患者免疫治療前后外周血中CD3+、CD4+和CD8+封閉效率的變化，了解免疫治療的效果。
　　2.分析免疫治療前后外周血中T淋巴細胞（CD3+、CD4+和CD8+）封閉效率與妊娠結局的關系，進一步探討其在RSA中的診治價值。
　　資料與方法:
　　1、研究對象
　　2010年10月-2012年10

7、月就診于鄭州大學第三附屬醫(yī)院生殖中心，封閉抗體為陰性接受主動免疫治療的復發(fā)性流產患者300例，其中放棄治療的有58例（因患者個人原因），隨訪失敗的有60例（因聯(lián)系方式更改），數據有效納入分析的有182例，年齡36±10歲，其中26-36歲89例，37-46歲93例。自然流產次數和例數:6次24例，5次37例，4次34例，3次87例。
　　2、研究方法
　　對復發(fā)性流產患者采用雙熒光標記流式細胞分析技術，以患者丈夫（或與患者無

8、血緣關系健康男性）的淋巴細胞為抗原靶標，測定患者外周血中T淋巴細胞CD3+、CD4+和CD8+的封閉效率（如CD3+、CD4+和CD8+中有一項負值，則診斷為封閉抗體缺乏，納入治療范圍）。對接受治療的患者檢測其治療前、后外周血T淋巴細胞中的CD3+、CD4+和CD8+的封閉效率，并對其治療后轉陽與未轉陽成功妊娠的結果進行觀察和統(tǒng)計分析。
　　3、統(tǒng)計學方法
　　將相關變量進行編碼后錄入Excel表格。采用統(tǒng)計學軟件SPSS1

9、7.0進行統(tǒng)計學處理，經正態(tài)性檢驗，如數據不服從正態(tài)分布采用秩和檢驗進行分析;定量資料采用中位數和四分位數間距進行描述，檢驗水準α=0.05。
　　結果:
　　1.RSA患者主動免疫治療后，外周血T細胞中的CD3+、CD4+和CD8+的封閉效率高于治療前(P＜0.05)。
　　2.182例患者治療結局中未轉陽的患者與轉陽的患者CD3+、CD4+和CD8+治療前、后的值比較有顯著差異(P＜0.05)，且治療后轉陽的患者外

10、周血中CD3+、CD4+和CD8+的值高于治療后未轉陽的患者(P＜0.05)。
　　3.182例患者治療后未轉陽的有133例，妊娠且保胎成功的有22例;轉陽的有49例，妊娠且保胎成功的有15例。轉陽和未轉陽患者的妊娠后保胎成功率分別為:31％、17％(P＜0.05)。
　　結論:
　　1.對RSA患者外周血CD3+、CD4+和CD8+封閉效率的檢測可成為評價免疫治療效果的有效指標之一，在臨床上具有診治價值。