強力霉素對退變腰椎間盤中MMP-3表達水平的調控研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:研究強力霉素對退變腰椎間盤中基質金屬蛋白酶-3(matrix metalloproteinase-3,MMP-3)表達水平的調控作用,為腰椎間盤退變的病人尋找新型藥物治療。
  方法:1.按隨機數字表隨機將40只大鼠分為對照組和實驗組各20只,制備動物模型,8周后實驗組動物每日皮下注射強力霉素25mg,分早晚兩次注射,對照組動物每日皮下注射等體積的生理鹽水,分早晚兩次注射。2周后取腰椎間盤組織,一部分放置10%中性福爾馬林固

2、定,另一部分存放在液氮中;2.免疫組織化學檢測:取福爾馬林固定好的樣本應用免疫組織化學SP法檢測腰椎間盤組織中MMP一3的表達,陽性表達為為棕黃色,主要存在于細胞漿內,用Image-Pro Plus6.3軟件測量實驗組和對照組的平均光密度值;3.蛋白印跡實驗(Western—bloting)檢測:用液氮中保存的樣品采用抽提椎間盤髓核的蛋白,轉膜后 X線顯影,再在培清 JS-780全自動凝膠圖像分析系統成像,測平均相對含量。
  結

3、果:免疫組織化學檢測中,實驗組大鼠椎間盤組織 MMP~3表達弱陽性,對照組表達陽性,測量實驗組和對照組的平均光密度值,實驗組MMP-3表達較對照組MMP-3表達低(P<0.01),蛋白印跡實驗(Western—bloting)檢測中,測量成像后MMP-3圖像和相應的Actin的比值,將兩者的比值作為MMP-3的相對含量,結果實驗組MMP-3相對含量較對照組MMP-3相對含量低(P<0.01)。
  結論:⒈SD大鼠腰椎退變模型成功

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