IL-24對人宮頸癌細胞株C33A細胞的影響.pdf

1、目的：以攜帶有目的基因IL-24的穿梭質(zhì)粒pAdtrackCMV轉(zhuǎn)染C33A細胞，觀察IL-24對人宮頸癌C33A細胞凋亡、體外增殖及遷移力的影響。 方法：將IL-24真核表達載體padtrack—cmv/IL-24和空載體padtrack—cmv分別用脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染體外培養(yǎng)的C33A細胞，以轉(zhuǎn)染空載體pAdtrackCMV的C33A細胞作為空載體對照，以C33A細胞作陰性對照，在熒光顯微鏡下觀察轉(zhuǎn)染熒光效應，用MTT法檢測細胞增

2、殖情況，流式細胞儀檢測細胞凋亡指數(shù)，細胞劃痕實驗觀察細胞遷移力變化。 結果： 1．IL-24組、空載體組及陰性對照組C33A細胞于熒光顯微鏡下觀察，可見IL-24組、空載體組大量細胞發(fā)綠色熒光，陰性對照組細胞未見綠色熒光。 2．IL-24組、空載體組及陰性對照組C33A細胞MTT比色法測定，三組之間的OD值差異有顯著性(P＜0.001，P＜0.001)。IL-24組OD值明顯低于空質(zhì)粒組和陰性對照組(P＜0.05

3、)，而空質(zhì)粒組和陰性對照組的OD值無明顯差異(P=0.993)。生長曲線圖中后兩者生長曲線相似，IL-24轉(zhuǎn)染組細胞增殖受到明顯抑制。 3．流式細胞儀檢測未轉(zhuǎn)染、轉(zhuǎn)染空載體及轉(zhuǎn)染IL-24后的各組C33A細胞平均凋亡率分別為3.34％，3.37％，13.47％。三組C33A細胞凋亡細胞率的差異具有統(tǒng)計學意義，兩兩比較，IL-24組凋亡率與其他兩組有統(tǒng)計學意義(P＜0.001，P＜0.001)，IL-24組細胞早期凋亡率明顯高于空

4、質(zhì)粒組和陰性對照組，空載體組與陰性對照組比較無統(tǒng)計學意義(P=0.969)，在周期檢測中，三個實驗組G0/G1、S、G2/M期細胞比例的總體差異均具有顯著性(G0/G1：F=77.491，P＜0.001；S：F=8.008，P＜0.05；G2/M：F=10.502，P＜0.05)。與空質(zhì)粒組和陰性對照組相比，IL-24組G0/G1期細胞比率增多(PG0/G1＜0.001)，S期細胞比率減少(PS＜0.05)，G2/M期細胞減少(PG2/

5、M＜0.05)，而空質(zhì)粒組和陰性對照組無明顯差異(PG0/G1=0.485，PS=0.971，PG2/M=0.447)。 4．細胞劃痕實驗中，不同時間點鏡下比較IL-24組、空載體組及陰性對照組劃痕寬度變化，IL-24轉(zhuǎn)染組細胞遷移力受到抑制，劃痕愈合速度較慢。 結論： 1．IL-24基因可以將C33A細胞阻滯于G0/G1期，對C33A細胞的體外增殖，遷移有抑制作用； 2．IL-24基因有誘導C33A細胞