MAP-2基因轉(zhuǎn)染抑制惡性黑色素瘤細胞生長作用的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:以腺病毒-微管相關(guān)蛋白-2(Adenovirus-microtubule-associated protein-2,Ad-MAP-2)為載體,將MAP-2基因?qū)胧髳盒院谏亓鯞16C29、B16細胞系,研究MAP-2對惡性黑色素瘤(惡黑)細胞的形態(tài)學(xué)影響,以探討MAP-2基因超表達抑制惡黑細胞生長的作用及其作用機制,為惡黑的基因治療提供實驗依據(jù).方法:實驗分為六部分:(1)將Ad-MAP-2載體感染人胚腎(HEK293)細胞,利

2、用空斑實驗方法測定腺病毒的滴度.(2)將Ad-MAP-2載體以MOI值3.5感染B16細胞,以生理鹽水作為對照,觀察感染前后細胞的生長情況,計數(shù)感染前后細胞的數(shù)量變化,利用統(tǒng)計學(xué)軟件SPSS11.5進行數(shù)據(jù)分析.(3)光鏡對B16C29細胞感染前后的形態(tài)學(xué)進行連續(xù)觀察.(4)應(yīng)用流式細胞術(shù)(PI-ANNEXIN-V 染色方法)檢測MAP-2基因?qū)隑16、B16C29細胞后的細胞凋亡情況.(5)電子顯微鏡觀察MAP-2基因?qū)牒蠹毎黄?/p>

3、和細胞內(nèi)微管的改變.結(jié)論:(1)MAP-2在B16細胞內(nèi)的超表達,可對其生長起抑制作用.(2)MAP-2基因超表達能夠誘導(dǎo)B16C29、B16細胞的凋亡,并且該變化是其抑制惡黑細胞生長的原因之一.(3)Ad-MAP-2感染惡黑B16C29細胞后,可恢復(fù)或部分恢復(fù)惡黑細胞的樹突狀形態(tài).(4)MAP-2基因在惡黑細胞B16內(nèi)的超表達,可以使微管數(shù)量增加,微管延長、變粗,集合成束,沿細胞突起延伸,并且該變化是使細胞樹突形狀恢復(fù)的主要原因之一.

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