促生長激素神經肽對大鼠坐骨神經夾傷的治療作用.pdf

1、目的:神經病理性疼痛(neuropathicpain，NP)是由于軀體感覺系統(tǒng)的損傷或疾病所引起的疼痛。NP作為慢性疼痛的一種，由于發(fā)病率高，嚴重影響患者生活質量，目前已受到越來越多的關注和重視。然而，NP的發(fā)病機制復雜，其治療效果受到限制。促生長激素神經肽(galanin，Gal)與多種生物功能有關，如疼痛、發(fā)育和營養(yǎng)等。Gal可通過作用于Gal1型受體（galaninreceptor1，GalR1）和Gal2型受體（galaninr

2、eceptor2，GalR2）而發(fā)揮生物學效應。大量研究表明在神經損傷狀態(tài)下，背根神經節(jié)（dorsalrootganglion，DRG）和脊髓灰質后角(spinaldorsalhorn，SDH)內的Gal表達量上調，發(fā)揮抗疼痛、神經營養(yǎng)和促進神經再生等作用。本實驗利用大鼠坐骨神經夾傷模型來研究外源性Gal對坐骨神經夾傷大鼠DRG和SDH神經元內Gal及其受體表達的調節(jié)，在行為學、坐骨神經功能學和形態(tài)學等方面的變化探討外源性Gal對神經損

3、傷的保護作用及機制。通過本實驗為NP的實驗研究、神經損傷的臨床治療提供一定理論基礎和實驗依據。方法:將63只鞘內置管成功的大鼠隨機分成3組，每組21只:(1)夾傷組，即大鼠坐骨神經夾傷后每天鞘內注射10μ(l)人工腦脊液(artificialcerebrospinalfluid,ACSF);(2)夾傷+Gal絹，即大鼠坐骨神經夾傷后每天鞘內注射3μgGal;(3)對照組，即大鼠假手術后每天鞘內注射10μlACSF。術后每天進行行為學檢測

4、，并分別在術后8d、16d和24d，進行神經傳導速度(nerveconductionvelocity,NCV)測定，之后處死取材，再分別檢測各組Gal及其受體蛋白及mRNA表達水平，利用甲苯胺藍染色和透射電鏡觀察坐骨神經形態(tài)變化情況。結果:(1)通過行為學檢測發(fā)現，坐骨神經夾傷可引起大鼠觸覺異常性疼痛和熱痛閾值降低，而鞘內注射外源性Gal可顯著升高該閾值，并且可以使其提前恢復至正常水平。(2)Westernblot和Real-timeR

5、T-PCR結果顯示，與對照組相比，夾傷組大鼠DRG和SDH內Gal均明顯升高;與夾傷組相比，夾傷+Gal組大鼠DRG內Gal表達明顯下降，而SDH內Gal表達未見明顯變化。夾傷組大鼠DRG內GalR1表達明顯低于對照組，而SDH內GalR1明顯上調;鞘內注射Gal使坐骨神經夾傷大鼠DRG和SDH內GalR1繼續(xù)降低。與對照組相比，夾傷組大鼠DRG和SDH內GalR2均明顯升高;鞘內注射Gal后，其表達未見明顯變化。(3)利用肌電圖檢測、

6、甲苯胺蘭染色和透射電鏡觀察受損部位坐骨神經傳導速度和形態(tài)結構變化發(fā)現，外源性Gal可顯著改善受損坐骨神經的修復和再生。結論:鞘內注射外源性Gal減輕大鼠坐骨神經夾傷引起的觸覺異常性疼痛和熱痛覺過敏，并且促進損傷坐骨神經的修復，因此外源性Gal可以減輕神經損傷引起的NP并且具有明確的神經保護作用。在正常狀態(tài)、坐骨神經夾傷和坐骨神經夾傷鞘內注射Gal等不同狀態(tài)下，Gal及其受體mRNA和蛋白的表達有較強的可塑性，表明Gal及其受體參與了大鼠