限進高效液相色譜在體內藥物分析中的應用研究.pdf

1、本研究為考察限進高效液相色譜方法在體內藥物分析中的普遍適用性，采用限進填料結合單柱或柱切換系統(tǒng)，分別建立對極性的特布他林、非極性的替米沙坦和結構不穩(wěn)定的拓撲替康進行血藥濃度測定的方法。主要研究內容如下： 1、限進填料高效液相色譜法測定人血漿中特布他林的濃度為建立限進高效液相色譜測定人血漿中特布他林濃度的方法，直接進特布他林血漿樣品到液相色譜系統(tǒng)測定其濃度。色譜柱為限進填料柱(150mm×4.6mm，5μm)；柱溫：40℃；流動相

2、：甲醇-0.05M辛烷磺酸鈉溶液(含0.005M磷酸二氫鈉并用磷酸調pH至3.5)=5：95(v/v)；流速：0.8ml/min；進樣量：20μl；熒光檢測λex280nm/λem309nm。平均回收率為94.50％，校正曲線線性范圍為1～40μg/ml(r=0.9996)。日內和日間的平均RSD分別為2.53％，2.80％。最低檢測濃度為0.1μg/ml。本法準確、簡便、快速，適用于特布他林的血藥濃度測定及其藥動學研究。 2、

3、柱切換限進填料高效液相色譜法測定人血漿中替米沙坦的濃度為建立柱切換限進高效液相色譜測定人血漿中替米沙坦?jié)舛鹊姆椒ǎ瑢⒀獫{樣品直接進樣，經(jīng)限進填料預柱用甲醇-水=10：90(v/v)在線凈化并富集，然后洗脫切入C18分析柱用甲醇-水=63：37(v/v)進行分離，熒光檢測λex302nm/λem365nm。校正曲線線性范圍10～2000ng/ml(r=0.9995)，回收率為95.4％～97.7％，日內RSD為0.2％～2.6％，日間RS

4、D為2.1％～4.1％。最低檢測濃度為0.5ng/ml。本法可靠、簡便，適用于測定人血漿中替米沙坦?jié)舛燃捌渌巹訉W研究。 3、限進高效液相色譜法同時測定人血漿中拓撲替康內酯型和羧酸型的濃度為建立限進高效液相色譜同時測定人血漿中拓撲替康內酯型和羧酸型濃度的方法，直接進拓撲替康血漿樣品到液相色譜系統(tǒng)測定其濃度。色譜柱為限進填料柱(150mm×4.6mm,5μm)；柱溫：40℃；流動相：甲醇-0.05M磷酸鹽緩沖液(含1％三乙胺，pH6

5、.6)=13：87(v/v)；流速：1ml/min；進樣量：20μl；熒光檢測λex390nm/λem520nm。平均回收率為94.50％，校正曲線線性范圍為20～1000ng/ml。日內和日間RSD均不大于5％。由分析結果推得的動力學方程顯示37℃時在人血漿中拓撲替康由內酯型轉化為羧酸型為一級動力學過程，由此可進一步外推出采樣時刻拓撲替康內酯型和羧酸型各自的濃度。本法準確、快速，適用于拓撲替康兩種結構的血藥濃度同時測定及其藥動學研究。