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文檔簡介
1、心肌梗塞疾病是長期困擾醫(yī)學界的難題,因為心肌壞死后不能再生,損傷心肌的修復是由成纖維細胞完成的.人們正在探索的干細胞移植技術,為病損心臟的細胞重建及衰竭心臟的功能恢復,提供了一種全新的治療策略.研究表明移植后的骨髓間充質干細胞(mesenchymal stem cells,MSCs)和骨骼肌衛(wèi)星細胞可以在心梗壞死區(qū)向心肌分化.體外實驗也發(fā)現在特定的誘導因子作用下MSCs可向心肌細胞分化.該實驗初步探討5-氮胞苷體外誘導MSCs向心肌分化
2、的最佳條件和體外分化的過程,骨骼肌衛(wèi)星細胞體外分化的過程以及N-ACh受體表達,為進一步研究細胞在體移植或臨床應用提供實驗依據.第一部分:體外培養(yǎng)Sprague-Dawley(SD)大鼠的MSCs,反復傳代至P3、P6或P12;用5-氮胞苷誘導,比較不同誘導濃度組、不同誘導時間組和不同體重動物組MSCs的分化率,觀察誘導后細胞分化過程中形態(tài)學的動態(tài)變化,并且用cardiac troponin Ⅰ、desmin和α-sarcomeric
3、actin抗體鑒定分化的心肌樣細胞,α-銀環(huán)蛇毒素鑒定乙酰膽堿受體.第二部分:體外培養(yǎng)新生SD大鼠和雞胚的骨骼肌衛(wèi)星細胞,差速貼壁法純化.觀察細胞體外分化過程,用α-sarcomeric actin、desmin和skeletal myosin抗體鑒定骨胳肌特異性蛋白的表達.ACh刺激肌管收縮,并鑒定肌管表面的乙酰膽堿受體.總結二部分實驗結果,得到以下結論:1、MSCs經10μmol/L濃度的5-氮胞苷體外誘導24h后易向心肌樣細胞分化
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