ING4和HIF-la在人腦星形細胞瘤中表達的研究.pdf

1、背景與目的
　　 星形細胞瘤是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中常見的神經(jīng)上皮組織腫瘤，惡性程度高，不易手術徹底切除，預后較差。隨著腫瘤分子生物學的發(fā)展，人們逐漸認識到腫瘤的形成與很多因素有關，如正常的細胞周期失控、腫瘤新生血管的形成、腫瘤內部缺氧環(huán)境的耐受以及細胞接觸抑制的喪失等。癌基因的激活和抑癌基因的失活在腫瘤的形成中起到了關鍵性的作用，多種細胞因子參與這一過程。ING4（inhibitor of growth4）是近年來發(fā)現(xiàn)的生長抑制因子家

2、族中的一位新成員，它在調控細胞周期、促使細胞凋亡、抑制血管的生成和恢復細胞間的接觸抑制中起著重要的作用，是一個重要腫瘤的生長抑制因子。腫瘤內部的普遍缺氧環(huán)境可以引起缺氧誘導因子-1a(hypoxia induciblefactor-1a，HIF-1a)表達活性增強，HIF-1a可以促進腫瘤新生血管的形成，改善腫瘤內部缺氧的狀態(tài)，平衡腫瘤細胞對氧的需求，促進腫瘤的增殖和侵襲。二者的異常表達均與腫瘤的惡性生物學行為關系密切。有研究發(fā)現(xiàn)，IN

3、G4可以通過抑制HIF-1a的活性，來減少IL-8的生成，從而抑制腫瘤血管的形成。這一過程中具體的作用機制尚未完全清楚。本課題采用免疫組化和RT-PCR方法檢測ING4和HIF-1a在星形細胞瘤中的表達情況，探討它們在星形細胞瘤發(fā)生和發(fā)展中的作用，與病理學分級的關系以及二者之間的相關聯(lián)系。并為臨床工作提出指導性意見，為星形細胞瘤的診治及預后判斷提供新的思路。
　　 材料與方法
　　 研究對象為2009年1月至2009年9

4、月鄭州大學第二附屬醫(yī)院神經(jīng)外科手術切除的45例星形細胞瘤標本。所有病例均為原發(fā)病例，術前未經(jīng)放射治療和化療。一部分標本經(jīng)10％中性福爾馬林液固定，石蠟包埋；另一部分標本迅速放入液氮罐內，后放入-80℃冰箱內保存。按照2000年WHO中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤分類標準，把24例Ⅰ～Ⅱ級標本設為低度惡性實驗組，21例Ⅲ～Ⅳ級設為高度惡性實驗組，11例非瘤腦組織為對照組。非瘤腦組織取自腦外傷、腦出血患者內減壓者。先采用免疫組化法檢測ING4蛋白和HIF

5、-1a蛋白在11例非瘤腦組織和45例星形細胞瘤標本的表達情況，在此基礎上，又采用RT-PCR檢測ING4基因和HIF-1a基因的mRNA在11例非瘤腦組織和45例星形細胞瘤標本的表達量。統(tǒng)計學采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件，檢驗水準取a=0.05。
　　 結果：
　　 1.免疫組化染色結果：ING4蛋白在非瘤腦組織均見表達(100％)，明顯高于星形細胞瘤中的陽性表達率(42.2％)，且在Ⅰ～Ⅱ級組中的陽性表達率(58.3％

6、)高于Ⅲ～Ⅳ級組的陽性表達率(23.8％)，經(jīng)統(tǒng)計學分析，均存在著顯著性差異(P＜0.05）。HIF-1a蛋白在非瘤腦組織中未見表達(0)，明顯低于星形細胞瘤中的陽性表達率(71.1％)，且在Ⅰ～Ⅱ級組中的陽性表達率(54.2％)低于Ⅲ～Ⅳ級組的陽性表達率(90.5％)，均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。
　　 2.RT-PCR檢測結果：ING4基因在非瘤腦組織、星形細胞瘤、Ⅰ～Ⅱ級組和Ⅲ～Ⅳ級組中mRNA的表達量分別1.19±0

7、.22、0.62±0.34、0.78±0.27和0.43±0.32，統(tǒng)計學分析，ING4基因mRNA的表達量在非瘤腦組織和星形細胞瘤之間，Ⅰ～Ⅱ級組和Ⅲ～Ⅳ級組之間均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。HIF-1a基因在非瘤腦組織、星形細胞瘤、Ⅰ～Ⅱ級組和Ⅲ～Ⅳ級組中mRNA的表達量分別0.26±0.16、0.70±0.33、0.46±0.23和0.98±0.15，統(tǒng)計學分析，HIF-1a基因mRNA的表達量在非瘤腦組織和星形細胞瘤之間，Ⅰ～

8、Ⅱ級組和Ⅲ～Ⅳ級組之間均存在著顯著性差異(P＜0.05)。
　　 3.相關性分析：在ING4基因mRNA表達量較高的低級別星形細胞瘤標本中，HIF-1a表達量趨向于減少，而在ING4基因mRNA表達量較低高級別星形細胞瘤標本中，HIF-1a表達量趨向于增多，經(jīng)統(tǒng)計學處理，二者呈中度負相關，Pearson相關系數(shù)為-0.553（P＜0.05）。
　　 結論：
　　 1.ING4在星形細胞瘤中表達下降或者缺失，隨著病