缺血再灌通過內(nèi)質網(wǎng)應激誘導大鼠海馬tau蛋白過度磷酸化.pdf

1、老年性癡呆癥（AD）是最常見的神經(jīng)退行性病，占成人癡呆癥的60%。AD 患者臨床癥狀主要表現(xiàn)為認知障礙、學習記憶力降低等，它的兩大神經(jīng)病理學特征是神經(jīng)元內(nèi)大量纖維纏結(NFTs）聚積及神經(jīng)細胞間的大量老年斑（SP）沉積。其中神經(jīng)纖維纏結（NFTs）主要由過度磷酸化的tau 蛋白形成。Tau 蛋白是微管相關蛋白，過度磷酸化后則失去了其促進微管組裝、維持軸突運輸?shù)壬飳W功能。AD 病人的癡呆程度和過度磷酸化的tau 蛋白所形成的NFTs的數(shù)

2、量密切相關。Tau 蛋白磷酸化受蛋白激酶和磷酸酯酶的共同調(diào)節(jié)，其中糖原合酶激酶-3b Glycogen synthase kinase-3b GSK-3b和蛋白磷酸酯酶2A（PP2A）是參與AD樣tau 蛋白過度磷酸化的重要激酶和酯酶。缺血再灌是腦損傷過程中常見的重要病理生理過程之一，有學者提出AD的“缺血-再灌注”發(fā)病學說，認為缺血再灌是散發(fā)性AD發(fā)病的重要的病理生理過程。但有關缺血再灌誘發(fā)AD的分子機制仍不清楚。缺血再灌可引起神經(jīng)細

3、胞的應激反應，如內(nèi)質網(wǎng)應激（ER Stress）。GRP78/Bip作為內(nèi)質網(wǎng)固有分子伴侶，在ER 應激時表達增高，是ER激的標記物。研究發(fā)現(xiàn)AD人腦中有著明顯的ER激和Bip表達增加。缺血或缺血再灌能否通過ER 應激影響tau白磷酸化水平的改變，有待證實。ER激可激活P38JNK 二者是重要的應激誘導的激酶。
　　 本研究以SD大鼠為研究對象，利用雙側頸動脈夾閉法復制腦缺血動物模型，觀察大鼠腦缺血20min、缺血20min再灌

4、不同時間（1d、3d、5d）的海馬tau 蛋白磷酸化水平的變化，GSK-3bPP2A表達及活性的變化，P38、JNK表達及活性的變化。結果發(fā)現(xiàn)缺血20min后再灌可誘導大鼠海馬tau 蛋白在Ser396、Ser404、Ser198/199/202位點磷酸化水平顯著增高；Bip表達水平在缺血20min 及缺血20min后再灌不同時間（1d、3d、5d）均顯著增高；缺血及缺血再灌對P38、JNK、GSK3bPP2A 催化亞基（PP2Ac）表

5、達無明顯影響；P38 磷酸化水平在缺血及缺血再灌后顯著增高，JNK 磷酸化水平無顯著變化；GSK3b Ser9位點磷酸化水平在缺血20min 再灌3d、5d 顯著降低，Tyr216位點磷酸化水平在缺血及缺血再灌后均顯著增高；PP2Ac Tyr307位點磷酸化在缺血20min后再灌不同時間（1d、3d、5d）均顯著增高。為進一步明確ER 應激在缺血再灌誘導的tau 蛋白過度磷酸化中的關鍵作用，我們將ER 應激抑制劑—PBA 補充給缺血再灌