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文檔簡介
1、論文用全細胞膜片鉗技術在急性分離培養(yǎng)的棉鈴蟲中樞神經細胞和海馬錐體神經元上,分別觀察三氟氯氰菊酯對棉鈴蟲和海馬神經細胞通道電流的作用影響。旨在研究殺蟲劑對棉鈴蟲中樞神經細胞鉀通道有無作用以及作用機制,進一步研究棉鈴蟲抗性形成機制;研究殺蟲劑對哺乳動物神經細胞鈉鉀通道的毒性影響及作用方式,探討殺蟲劑對害蟲和哺乳動物神經細胞毒性的差異,以期為設計具有新靶標和對害蟲高效、對哺乳動物低毒的有效藥物提供理論依據。主要實驗結果如下: 1.細
2、胞培養(yǎng):分離得到的棉鈴蟲和海馬神經細胞,胞體明亮,有較長突起,細胞表面光潔,有較強的光暈,立體感強,貼壁良好。 2.三氟氯氰菊酯對棉鈴蟲神經細胞瞬間外向鉀電流的影響:結果表明,加藥前通道在-40mV左右激活,三氟氯氰菊酯(10-5mmol/L)作用后,激活電壓向負電位方向移動約10mV,通道在-50mV左右激活,電流幅值未有明顯變化;加藥前后激活曲線的Vh、k值和形狀無明顯改變;失活曲線左移且Vh變化明顯,給藥前后的Vh和k分別
3、為-48.472±0.763、8.123±0.672和-59.299±1.46、10.573±1.36。但k值沒有明顯變化。 3.三氟氯氰菊酯對棉鈴蟲神經細胞延遲整流鉀電流的影響:結果表明,藥物作用前分別有81%和39%的細胞的通道在-30mV和-40mV激活(n=21)。三氟氯氰菊酯(10-5mmol/L)作用15min后,分別有63%和38%細胞的通道在-40mV和-50mV激活(n=8);作用1min后電流幅值明顯降低,抑
4、制率達到了37.7%(n=19);加藥后激活曲線明顯左移且Vh值變化顯著,給藥前后的Vh和k分別為11.4±2.32、20.5±2.19和2.45±0.878、24.9±1.15。 4.三氟氯氰菊酯對大鼠海馬錐體神經元鉀電流的作用影響:結果表明,低濃度(10-7mmol/L)和高濃度(10-5mmol/L)三氟氯氰菊酯對瞬間外向鉀通道分別有激活和抑制作用,但它們對峰電流的改變沒有顯著性差異。高濃度三氟氯氰菊酯使通道激活曲線稍微右
5、移,Vh和k改變不明顯;但是能夠使通道失活曲線明顯左移,給藥前和給藥后10minVh和k分別為-70.711±0.445mV、7.2840±0.403和-90.398±0.839mV、11.602±0.658,半數激活電壓Vh改變顯著。但試驗中發(fā)現藥物對延遲整流鉀電流峰值沒有影響。 5.高濃度三氟氯氰菊酯對大鼠海馬神經元鈉通道的影響:高濃度三氟氯氰菊酯(10-3mmol/L)作用后,海馬錐體神經元鈉電流顯著降低,最大抑制率為32
6、.6%。鈉通道的激活電位在-70mV左右,藥物作用前后改變不大。峰值電壓左移大約10mV。激活曲線的Vh向負方向移動8mV左右。但是失活曲線的Vh向負方向移動17mV左右。但k值沒有明顯變化。 6.低濃度三氟氯氰菊酯對大鼠海馬神經元鈉通道的影響:低濃度三氟氯氰菊酯(10-5mmol/L)作用后,海馬錐體神經元鈉電流峰值增加明顯,最大增加率為26.6%。鈉通道的激活電位向超極化方向移動10mV左右。峰值電壓移動20mV,從-30m
7、Vto-50mV。激活曲線的Vh向負方向移動10mV左右,k值變化顯著。失活曲線的Vh向負方向移動8mV左右。 實驗結果表明:三氟氯氰菊酯促進了棉鈴蟲神經細胞瞬間外向鉀通道的失活。顯著抑制延遲整流鉀電流電流峰值,棉鈴蟲中樞神經細胞鉀通道也是擬除蟲菊酯類藥物的作用靶標之一。大鼠海馬錐體神經元鉀通道是三氟氯氰菊酯的作用靶標,通道失活失活曲線的改變是藥物作用的主要方式。不同濃度三氟氯氰菊酯對大鼠海馬神經元鈉電流有不同的作用影響,激活電
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