沉默Survivin基因對大腸癌HCT-8-VCR耐藥細胞凋亡及藥物敏感性影響的初步研究.pdf

1、南方醫(yī)科大學碩士學位論文沉默Survivin基因對大腸癌HCT-8/VCR耐藥細胞凋亡及藥物敏感性影響的初步研究姓名：鄭欣申請學位級別：碩士專業(yè)：內科學（消化系統(tǒng)疾?。┲笇Ы處煟汗?0080515中文摘要題。基因治療是逆轉腫瘤耐藥的重要策略之一。S u r v i v i n 是凋亡抑制蛋I 蘭t ( I A P ) 家族新成員，具有3 個主要特點：1 、S u r v i v i n基因是迄今發(fā)現(xiàn)最強的凋亡抑制因子。2 、在有絲分裂

2、的開始，S u r v i v i n 維護有絲分裂的正常進行，從而促進細胞增殖3 、S u r v i v i n 參與毛細血管網的形成，抑制血管內皮細胞凋亡，促進血管生成。S u r v i v i n m R N A 和蛋白幾乎在所有被研究的腫瘤細胞中過度表達，如肺癌、胃癌、大腸癌、乳腺癌、卵巢癌、腎腫瘤及黑色素瘤等，在惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展以及化療耐藥中起重要作用。T h o m b e r r y 和L a z e b n i k

3、 的實驗證實，c a S p a s e 活化的凋亡通路與化療藥物敏感性有密切關系，凋亡抑制基因表達上調或凋亡促進基因表達下調所導致的凋亡反應性降低是腫瘤細胞耐藥的原因之一。另有實驗證明下調S u r v i v i n 的表達可增強非小細胞肺癌細胞H 5 2 0 對順鉑的化療敏感性。S u r v i v i n 主要通過3 種方式直接或間接抑制c a s p a s e s 活性而發(fā)揮抗凋亡作用：1 、S u r v i v i n

4、 以同源二聚體的形式與終末效應器C a s p a s e s ．3 、C a s p a s e s 一7 形成穩(wěn)定的結合，從而抑制二者的蛋白切割作用，阻斷來自F a s ／F a s L 通路和( 或) 線粒體通路的凋亡信號，阻斷腫瘤細胞凋亡。2 、以S M A C 作為中介與C a s p a s e s ．9 結合抑制其活性3 、與細胞周期蛋白激酶c d k 4 、p 3 4 c d c 2 相互作用，使p 2 1 從C D K

5、 4 的復合體釋放出來，p 2 1 進一步與線粒體c a s p a s e ．3 結合，抑制其活性，使細胞凋亡受到抑制。K N A 干擾( R N Ai n t e r f e r i n g ，R N A i ) 技術為近年基因表達調控的研究熱點，它將與目的基因m R N A 序列互補的小分子干擾核糖核酸( s m a l l i n t e r f e r e n c eR N A ，s i R N A ) 或短發(fā)夾R N A (

6、 s h o r t h a i r p i n R N A ，s h R N A ) 導入靶細胞，通過序列互補配對法則特異性降解目的基因，抑制序列特異性的基因表達。R N A i 可以沉默癌基因、促進凋亡、調控細胞周期、抗血管生成。近年研究表明利用R N A i技術是S u r v i v i n 基因沉默的有力手段，且其作用強大、迅速。本課題組的前期研究發(fā)現(xiàn)，應用R N 處技術阻斷結腸癌細胞( L o v o ) 中S u r v