人臍帶間充質干細胞對人食管癌細胞的抑制作用研究.pdf

1、食管癌是目前困擾中國等國家的一種主要的健康問題,傳統(tǒng)治療方案效果有限,急需開發(fā)新型有效的基因或細胞治療方法。近年來,干細胞對一些疾病的治療研究均取得了重要進展,而干細胞治療的應用研究是醫(yī)學領域乃至整個生命科學領域前沿。間充質干細胞(Mesenchyrml stem cells,MSCs)是干細胞的一種類型,因能分化為間質組織而得名。研究表明,MSC廣泛存在于成人個體的多種組織中,目前己經在骨髓、肌肉、大腦、骨膜、脂肪、真皮、臍血和臍帶等

2、多種組織中均證實有間充質干細胞的存在。由于發(fā)現(xiàn)MSCs能夠募集至腫瘤組織,過去十年間,人們饒有興致的將外源性的間充質干細胞作用于不同的腫瘤模型,觀察其對于腫瘤的影響,但是最終結論多是矛盾的,有的說促進腫瘤生長,有的說抑制腫瘤生長?？赡苣[瘤類別、細胞來源、模型類型和處理方法等因素都會引起上述矛盾結果的形成,因此,盡管MSCs已經廣泛應用于組織工程等再生性疾病的治療,但是臍帶來源的MSCs對于食管癌的可能作用,依然需要細致系統(tǒng)的研究。

3、>　　 為此,本文第一部分首先研究了臍帶來源的間充質干細胞(hMSCs)對食管癌細胞(ECs)可能的體外作用,發(fā)現(xiàn)至少在體外共培養(yǎng)系統(tǒng),hMSCs具有對于ECs的趨向性,能夠抑制腫瘤生長,誘導ECs凋亡,并且存在自發(fā)細胞融合,而血清成分可能中和抑制作用。
　　 隨后第二部分闡述了臍帶間充質干細胞對食管癌細胞體外抑制作用的可能機制,通過細胞融合模型以及轉錄組芯片分析發(fā)現(xiàn)融合誘導的DNA損傷和凋亡調控、代謝抑制和免疫調控等都可能參

4、與了hMSCs對于ECs抑制作用,其中MAPK通路的負反饋抑制兇子DUSP6/MKP3可能發(fā)揮了關鍵作用。異源過表達實驗證實DUSP6可以有效的抑制ECs生長、促進凋亡、抑制其成瘤性。而且沒有形成腫瘤干細胞,反而可能發(fā)生了趨向良性細胞的轉分化。
　　 最后本研究的第三部分繼續(xù)探討了hMSCs對ECs裸鼠移植瘤的可能體內作用,結果發(fā)現(xiàn)標記的hMSCs,提供尾靜脈注射后,主要分布于荷瘤鼠的心肺和肝臟,對ECs移植瘤沒有顯著的遷移趨向

5、性。大批量的動物實驗證明,單獨的hMSCs-ECs混合接種或尾靜脈注射的對于ECs的生長作用均有抑制趨勢,而hMSCs-ECs混合接種再持續(xù)尾靜脈處理則有統(tǒng)計學顯著的抑制作用。
　　 綜上所述,我們系統(tǒng)的研究了hMSCs對于人食管癌細胞的可能作用。發(fā)現(xiàn)hMSCs在體外具有對ECs的趨向性和抑制作用,可能細胞融合后DUSP6高表達誘導凋亡、抑制EC細胞生長而免疫調控和良性轉分化可能也是重要的參與機制。但是體內未能證實hMSCs對于

6、ECs移植瘤組織的趨向性,而hMSCs對于ECs移植瘤的抑制作用也需要1)大于4倍的細胞比；2)與EC細胞直接接觸；3)維持外周環(huán)境充足的hMSCs。
　　 我們的研究結果說明至少在體外水平,臍帶來源的間允質干細胞具有抑制食管癌細胞生長的作用,但是在動物體內復雜環(huán)境里,可能由于血清等因素的干擾而中和了hMSCs的抑癌作用。細胞融合可能是抑制作用的一種主要機制,同時融合并沒有提高形成腫瘤干細胞的可能性,只是促進食管癌細胞向惡性程度