T細胞活化中NF-κB通過特異性結合Cbl-b啟動子序列負向調控Cbl-b表達.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、NF-κB和Cbl-b均是T細胞活化信號網絡中重要分子,其調控關系尚不完全清除。研究發(fā)現Cbl-b可影響T細胞內NF-κB水平。鑒于信號分子間調控作用的相互性,我們設想NF-κB是否對Cbl-b也有調控作用?因此,我們分離一種T細胞特異性NF-κB活化障礙小鼠的T細胞,westernblot發(fā)現其Cbl-b顯著升高。利用AliBaba2.1軟件分析,發(fā)現Cbl-b啟動子中含有可與NF-κB結合的核苷酸序列。這初步證實我們的設想。本項目將

2、進一步利用EMSA來驗證NF-κB與預測的Cbl-b啟動子中特定核苷酸序列結合及其特異性。通過轉染質粒構建NF-κBP65超量表達,并通過雙報告基因技術觀察其對CBL-B啟動子序列介導的蛋白翻譯和轉錄的影響。還將應用小分子化合物下調T細胞內NF-κB,同時監(jiān)測Cbl-bmRNA的相應變化和T細胞活化情況。同時通過用小分子化合物體內應用于CBL-B敲除小鼠的心臟移植模型,觀察此NF-κB抑制劑在野生型小鼠上引導的心臟移植物存活延長的效應能

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