炎癥對人腎系膜細胞增殖的影響及曲格列酮的干預機制探討.pdf

1、目的：觀察曲格列酮對腫瘤壞死因子α(TNF-α)誘導的人腎小球系膜細胞(HMCL)增殖及細胞間黏附分子-1(ICAM-1)mRNA和蛋白表達的影響，探討曲格列酮在炎癥誘導的系膜細胞中的作用及其可能機制，為臨床治療提供藥理學靶點和理論依據(jù)。 方法：將培養(yǎng)的HMCL分為空白對照組，不同濃度HNF-α誘導組，不同濃度曲格列酮干預組，曲格列酮對照組。采用噻唑藍比色法(MTT)檢測各組系膜細胞增殖水平，逆轉錄-多聚酶鏈反應(RT-PCR)

2、法檢測各組系膜細胞ICAM-1mRNA的表達水平，酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測各組系膜細胞培養(yǎng)上清中ICAM-1蛋白表達水平，免疫細胞化學(ICC)法檢測各組系膜細胞NF-κB蛋白的表達水平。 結果： (1)MTT法結果分析：不同濃度TNF-α組系膜細胞增殖水平明顯高于空白對照組(P＜0.05)，在TNF-α誘導的48h內，于24h呈現(xiàn)增殖高峰，與6h組比較有統(tǒng)計學差異(P＜0.05)，各濃度曲格列酮干預組系膜細胞

3、增殖水平明顯低于TNF-α誘導組(P＜0.05)。 (2)RT-PCR結果分析：不同濃度TNF-α誘導組ICAM-1mRNA表達明顯增高，與空白對照組比較有統(tǒng)計學差異(P＜0.05)，各濃度曲格列酮干預組系膜細胞ICAM-1mRNA表達明顯低于TNF-α誘導組(P＜0.05)。 (3)ELISA結果分析：不同濃度TNF-α誘導組ICAM-1蛋白表達明顯增高，與空白對照組比較有統(tǒng)計學差異(P＜0.05)，各濃度曲格列酮干預

4、組系膜細胞ICAM-1蛋白表達明顯低于TNF-α誘導組(P＜0.05)。 (4)ICC結果分析：不同濃度TNF-α誘導組NF-κB蛋白表達陽性率明顯增高，與空白對照組比較有統(tǒng)計學差異(P＜0.05)，各濃度曲格列酮干預組系膜細胞NF-κB蛋白表達陽性率明顯低于TNF-α誘導組(P＜0.05)。 結論： (1)TNF-α可增強系膜細胞增殖，上調細胞表面ICAM-1mRNA和蛋白的表達，并使NF-κB蛋白的表達增高，